Báo cáo khoa học: Spatio-temporal profiling and degradation of a-amylase isozymes during barley seed germination

Tác giả: Kristian S. Bak-Jensen, Sabrina Laugesen, Ole Østergaard, Christine Finnie, Peter Roepstorff, and Birte Svensson

Lĩnh vực: Enzyme and Protein Chemistry, Biochemistry, BioCentrum-DTU, Technical University of Denmark, Lyngby, Denmark; Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of Southern Denmark, Odense M, Denmark; Carlsberg Laboratory, Department of Chemistry, Copenhagen Valby, Denmark.

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tích sự xuất hiện và biến đổi của các isoenzyme α-amylase trong quá trình nảy mầm hạt lúa mạch, sử dụng kỹ thuật điện di 2D, blotting và phổ khối. Kết quả cho thấy sự biểu hiện và phân hủy của các dạng α-amylase thay đổi theo thời gian và vị trí trong hạt, với các isoenzyme khác nhau có vai trò trong quá trình này. Nghiên cứu cũng đề cập đến sự khác biệt giữa các giống lúa mạch và mối liên hệ tiềm năng với chất lượng mạch nha.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Abbreviations
• Results and Discussion
• 2DE western blot profiling of barley AMY during germination
• Mass spectrometric identification of AMY forms
• Gibberellic acid and multiple AMY forms
• Sequential degradation of AMY during germination
• Tissue localization of AMY
• Cultivar-specific AMY spot patterns
• Physiological implications of the AMY repertoire
• Experimental procedures
• Plant material
• Protein extraction
• 2D gel electrophoresis
• Western blotting
• In-gel digestion and sample preparation for MS
• Protein identification by peptide mass fingerprinting
• Tandem MS sequencing
• References