Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 147 KB

Giới thiệu nội dung

Enzymatic Oxidation Of Nadp+ To Its 4-oxo Derivative

Tác giả: Matteo de Rosa, Andrea Pennati, Vittorio Pandini, Enrico Monzani, Giuliana Zanetti, Alessandro Aliverti

Lĩnh vực: Hóa sinh, Khoa học sự sống

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này khám phá phản ứng oxy hóa NADP+ thành dẫn xuất 4-oxo của nó, 3-carboxamide-4-pyridone adenine dinucleotide phosphate (NADPO), được xúc tác bởi enzyme ferredoxin-NADP+ reductase (FNR) loại adrenodoxin reductase (AdR). Phản ứng này, diễn ra với tốc độ rất chậm và đòi hỏi sự tham gia của FAD gắn với enzyme, diễn ra một cách đặc hiệu tại vị trí C4 của vòng nicotinamide trong NADP+. Các thí nghiệm biến đổi protein đã loại trừ vai trò của các gốc amino acid Glu214 và His57 trong quá trình xúc tác. Kết quả chỉ ra rằng bước tấn công ái lực của phân tử nước vào vòng nicotinamide là bước ban đầu và quyết định tốc độ của cơ chế xúc tác. Các FNR loại thực vật không có khả năng thực hiện phản ứng này, cho thấy đây là đặc điểm riêng của FNR loại AdR. NADPO được xác định là một chất ức chế cạnh tranh đối với NADPH trên nhiều loại FNR, cho thấy nó có thể là một công cụ hữu ích để nghiên cứu vị trí gắn kết cơ chất của các enzyme phụ thuộc NADPH.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả và Thảo luận
  • Phân lập, định lượng và đặc tính quang phổ của NADPO
  • Các FNR loại thực vật không xúc tác sự hình thành NADPO
  • Vai trò của O2 trong quá trình oxy hóa NADP+ do enzyme xúc tác
  • Động học của sự hình thành NADPO do FprA và AdR xúc tác
  • Điều tra vai trò của Glu214 và His57 của FprA trong quá trình xúc tác tạo NADPO
  • NADPO như một chất ức chế FNR
  • Quy trình thực nghiệm
  • Xác định các loài oxy phản ứng được tạo ra trong phản ứng giữa NADP+ và O2 do FprA xúc tác
  • Các xét nghiệm hoạt tính enzyme
  • Nghiên cứu liên kết phối tử
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo