Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 12 trang
Dung lượng: 247 KB

Giới thiệu nội dung

2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5′-phosphate synthases of fungi and archaea

Tên đề tài: 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5′-phosphate synthases of fungi and archaea

Tác giả: Werner Römisch-Margl, Wolfgang Eisenreich, Ilka Haase, Adelbert Bacher, Markus Fischer

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này so sánh các enzyme 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5′-phosphate synthase từ nấm men Candida glabrata, vi khuẩn cổ Methanocaldococcus jannaschii và vi khuẩn Aquifex aeolicus. Các enzyme này đều chuyển hóa 2,5-diamino-6-ribosylamino-4(3H)-pyrimidinone 5′-phosphate thành 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5′-phosphate. Nghiên cứu cũng làm rõ vai trò của các enzyme này trong con đường sinh tổng hợp riboflavin (vitamin B2), một coenzyme thiết yếu cho nhiều quá trình trao đổi chất trong các sinh vật sống. Sự khác biệt trong con đường sinh tổng hợp riboflavin giữa các giới sinh vật (vi khuẩn cổ, vi khuẩn, nấm và thực vật) đã được chỉ ra, đặc biệt là bước đầu tiên của quá trình tổng hợp.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Results
  • Pyrimidine reductase families
  • Enzyme preparation and quaternary structure
  • Experimental procedures
  • Materials
  • Strains and plasmids
  • Transformation
  • Cloning of 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5′-phosphate synthase from C. glabrata (CgIRED)
  • Preparation of a synthetic gene for 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5′-phosphate synthase from A. aeolicus
  • Fermentation
  • Purification of 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5′-phosphate synthase from C. glabrata
  • Purification of 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5′-phosphate synthase from A. aeolicus
  • Analytical ultracentrifugation
  • NMR spectroscopy
  • Assay of 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5′-phosphate synthase activity
  • Multiple sequence alignment
  • Acknowledgements
  • References
  • Supporting information