Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 71 trang
Dung lượng: 857 KB

Giới thiệu nội dung

Nghiên cứu tạo cây ngô chuyển gen DREB2.7 liên quan đến tính chịu hạn

Tác giả: Nguyễn Thùy Linh

Lĩnh vực: Khoa học Tự nhiên

Nội dung tài liệu:

Luận văn Thạc sĩ Khoa học này tập trung nghiên cứu về khả năng chịu hạn của cây ngô, một loại cây lương thực quan trọng. Do ảnh hưởng ngày càng nghiêm trọng của biến đổi khí hậu, tình trạng hạn hán đã gây tác động tiêu cực đến năng suất cây trồng. Nghiên cứu này hướng đến việc tạo ra giống ngô biến đổi gen có khả năng thích ứng cao với điều kiện hạn hán. Cụ thể, đề tài tập trung vào việc phân lập gen ZmDREB2.7 từ dòng ngô Tẻ vàng 1, phân tích đặc điểm của gen và protein dự đoán. Sau đó, gen ZmDREB2.7tv được chuyển vào dòng ngô thuần dưới sự điều khiển của promoter rd29A để đánh giá khả năng chống chịu hạn của cây ngô chuyển gen.

Mục lục chi tiết:

  • MỤC LỤC
  • DANH MỤC HÌNH
  • DANH MỤC BẢNG
  • BẢNG KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT
  • MỞ ĐẦU
  • Chương 1 – TỔNG QUAN
    • 1.1. Cây ngô và hạn hán
      • 1.1.1. Tình hình về cây ngô ở nước ta
      • 1.1.2. Hạn hán ảnh hưởng đến năng suất cây ngô
      • 1.1.3. Nâng cao năng suất ngô trong điều kiện hạn hán
    • 1.2. Nghiên cứu tạo cây ngô biến đổi gen chịu hạn
      • 1.2.1. Tình hình nghiên cứu tạo giống ngô biến đổi gen trên thế giới
      • 1.2.2. Tình hình nghiên cứu tạo giống ngô biến đổi gen chịu hạn trên thế giới
      • 1.2.3. Tình hình nghiên cứu cây ngô biến đổi gen ở Việt Nam
    • 1.3. Tính trạng chịu hạn ở thực vật và nhân tố phiên mã DREB
      • 1.3.1. Cơ sở phân tử của tính chống chịu hạn ở thực vật
      • 1.3.2. Họ nhân tố phiên mã DREB
      • 1.3.3. Nhân tố phiên mã ZmDREB2.7
  • Chương 2 – VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
    • 2.1. Vật liệu
      • 2.1.1. Mẫu thực vật
      • 2.1.2. Chủng vi khuẩn, vector và mồi
      • 2.1.3. Hóa chất và môi trường
      • 2.1.4. Thiết bị nghiên cứu
    • 2.2. Phương pháp nghiên cứu
      • 2.2.1. Tách chiết DNA
      • 2.2.2. Tách chiết RNA và tổng hợp cDNA
      • 2.2.3. Phương pháp PCR
      • 2.2.4. Tinh sạch DNA
      • 2.2.5. Tạo tế bào khả biến E. coli và biến nạp bằng sốc nhiệt
      • 2.2.6. Tạo tế bào khả biến A. tumefaciens và biến nạp bằng xung điện
      • 2.2.7. Nhân dòng gen ZmDREB2.7tv
      • 2.2.8. Tạo vector biểu hiện thực vật pCAMBIA1300/rd29A::ZmDREB2.7tv::polyA
      • 2.2.9. Chuyển gen vào cây ngô thông qua vi khuẩn A. tumefaciens
      • 2.2.10. Real-time PCR định lượng để ước lượng số bản sao của gen trong cây chuyển gen
      • 2.2.11. Real-time PCR định lượng để đánh giá sự biểu hiện của gen trong cây chuyển gen
      • 2.2.12. Phân tích cây chuyển gen
  • CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
    • 3.1. Kết quả phân lập gen ZmDREB2.7tv từ cây ngô Tẻ vàng 1
      • 3.1.1. Tách chiết DNA tổng số từ lá cây ngô Tẻ vàng 1
      • 3.1.2. Phân lập và tạo dòng gen ZmDREB2.7tv
      • 3.1.3. Phân tích trình tự gen ZmDREB2.7tv
    • 3.2. Kết quả thiết kế vector biểu hiện thực vật mang gen ZmDREB2.7tv
      • 3.2.1. Thiết kế vector trung gian pRTL2/rd29A::ZmDREB2.7tv
      • 3.2.2. Thiết kế vector biểu hiện pCAMBIA1300/rd29A::ZmDREB2.7tv
      • 3.2.3. Tạo chủng A. tumefaciens EHA105 mang vector biểu hiện
    • 3.3. Kết quả tạo cây ngô biến đổi gen mang gen ZmDREB2.7tv
      • 3.3.1. Chuyển gen ZmDREB2.7tv vào cây ngô thế hệ T0
      • 3.3.2. Đánh giá cây chuyển gen thế hệ T0
      • 3.3.3. Tạo và đánh giá cây chuyển gen thế hệ T1
      • 3.3.4. Ước lượng số bản sao của gen ZmDREB2.7tv trong cây chuyển gen thế hệ T1
      • 3.3.5. Đánh giá sự biểu hiện tương đối của gen ZmDREB2.7tv trong cây chuyển gen thế hệ T2
  • KẾT LUẬN
  • KIẾN NGHỊ
  • TÀI LIỆU THAM KHẢO