Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Xác định một số đột biến ở các gen NPM1 và FLT3 ở bệnh nhân Leukemia cấp dòng tủy bằng kỹ thuật RT-Pcr

XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐỘT BIẾN Ở CÁC GEN NPM1 VÀ FLT3 Ở BỆNH NHÂN LEUKEMIA CẤP DÒNG TỦY BẰNG KỸ THUẬT RT – PCR

Tác giả: Hà Mạnh Quyết

Lĩnh vực: Di truyền học

Nội dung tài liệu: Luận văn Thạc sĩ Khoa học này tập trung vào việc xác định các đột biến gen NPM1 và FLT3 ở bệnh nhân mắc bệnh Leukemia cấp dòng tủy thông qua kỹ thuật RT – PCR. Nghiên cứu nhằm mục đích hoàn thiện quy trình kỹ thuật RT – PCR để phát hiện các đột biến này, đồng thời khảo sát tỷ lệ đột biến NPM1-mutA và FLT3 ở nhóm bệnh nhân này. Các phương pháp chẩn đoán truyền thống như hình thái học tế bào và hóa học tế bào được xem xét, cùng với các kỹ thuật sinh học phân tử tiên tiến hơn.

Mục lục chi tiết:

• Đặt vấn đề
• Chương 1: Tổng quan tài liệu
  • 1.1. Leukemia cấp dòng tủy
  • 1.2. Lịch sử phát hiện leukemia cấp
  • 1.3. Cơ chế bệnh sinh leukemia cấp
    • 1.3.1. Sinh máu bình thường và leukemia cấp
    • 1.3.2. Sự liên quan giữa hệ thống gen trong tế bào với ung thư
    • 1.3.3. Cơ chế tổn thương phân tử dẫn đến leukemia cấp
    • 1.3.4. Một số nguyên nhân khác liên quan đến bệnh leukemia cấp
  • 1.4. Các phương pháp chẩn đoán leukemia cấp
    • 1.4.1. Phương pháp Hình thái học
    • 1.4.2. Phương pháp Miễn dịch học
    • 1.4.3. Phương pháp Di truyền tế bào và Sinh học phân tử
  • 1.5. Phân loại leukemia cấp
    • 1.5.1. Phân loại theo FAB (Pháp – Mỹ – Anh)
    • 1.5.2. Phân loại theo WHO
  • 1.6. Các đột biến gen trong leukemia cấp
    • 1.6.1. Đột biến gen NPM1
    • 1.6.2. Đột biến gen FLT3
    • 1.6.3. Các loại đột biến khác
  • 1.7. Một số kỹ thuật để phát hiện các đột biến gen trong leukemia cấp
    • 1.7.1. Kỹ thuật PCR (polymerase chain reaction)
    • 1.7.2. Kỹ thuật RT – PCR
    • 1.7.3. Kỹ thuật Nested PCR
    • 1.7.4. Giải trình tự Sanger
    • 1.7.4. Giải trình tự thế hệ hai NGS
• Chương 2: Đối tượng và phương pháp nghiên cứu
  • 2.1. Đối tượng nghiên cứu
  • 2.2. Vật liệu nghiên cứu
    • 2.2.1. Hóa chất sinh phẩn
    • 2.2.2. Trang thiết bị, máy móc
  • 2.3. Phương pháp nghiên cứu
    • 2.3.1. Thiết kế nghiên cứu
    • 2.3.2. Cách chọn mẫu
    • 2.3.3. Sơ đồ nghiên cứu
    • 2.3.4. Các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu
  • 2.4. Xử lý số liệu
  • 2.5. Vấn đề đạo đức trong nghiên cứu
• Chương 3: Kết quả và bàn luận
  • 3.1. Hoàn thiện quy trình phát hiện đột biến FLT3 và NPM1.
    • 3.1.1. Tách chiết RNA từ mẫu máu ngoại vi và dịch tủy xương
    • 3.1.2. Nhân bản đoạn gen chứa đột biến FLT3 – ITD
    • 3.1.3. Nhân bản đoạn gen chứa đột biến FLT3 – TKD
    • 3.1.4. Nhân bản đoạn gen chứa đột biến NPM1-mutA
  • 3.2. Đặc điểm của đột biến FLT3 và NPM1-mutA
    • 3.2.1. Tỷ lệ mắc bệnh AML theo tuổi
    • 3.2.2. Tỷ lệ mắc bệnh AML theo giới
    • 3.2.3. Đặc điểm người bệnh có đột biến gen NPM1-mutA, FLT3 – ITD, FLT3 – TKD theo nhóm tuổi
    • 3.2.4. Tỷ lệ xuất hiện các loại đột biến NPM1-mutA, FLT3 – ITD, FLT3 – TKD
    • 3.2.5. Mối liên quan giữa đột biến NPM1-mutA và FLT3
• Kết luận và kiến nghị
• Tài liệu tham khảo
• Phụ lục