Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 291 KB

Giới thiệu nội dung

Transglutaminase-mediated polyamination of vasoactive intestinal peptide (VIP) Gln16 residue modulates VIP/PACAP receptor activity

Tác giả: Salvatore De Maria, Salvatore Metafora, Vittoria Metafora, Francesco Morelli, Patrick Robberecht, Magalì Waelbroeck, Paola Stiuso, Alfredo De Rosa, Anna Cozzolino, Carla Esposito, Angelo Facchiano, Maria Cartenì

Lĩnh vực: Sinh hóa, Dược lý học, Miễn dịch học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cách thức biến đổi cấu trúc của peptide ruột hoạt mạch (VIP) thông qua quá trình polyamin hóa tại gốc Gln16, được xúc tác bởi enzyme transglutaminase. Ba dẫn xuất VIP đã được tổng hợp: VIPDap, VIPSpd và VIPspm, bằng cách gắn 1,3-diaminopropane, spermidine và spermine vào gốc Gln16. Các thử nghiệm gắn kết thụ thể và xác định hoạt tính adenylate cyclase cho thấy các dẫn xuất này hoạt động như các chất chủ vận cấu trúc của VIP, cả trong ống nghiệm và trong cơ thể sống. Cụ thể, VIPDap thể hiện ái lực và hiệu lực cao hơn VIP đối với thụ thể VIP/PACAP1 và VIP/PACAP2. VIPSpd và VIPspm cũng là chất chủ vận nhưng có ái lực thấp hơn VIP. Sự khác biệt về hoạt tính của các dẫn xuất này phản ánh sự khác biệt về điện tích dương và độ dài chuỗi carbon của polyamine gắn kết. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng độ dài chuỗi carbon của polyamine có thể đóng vai trò quan trọng trong tương tác với thụ thể. Ngoài ra, các thử nghiệm trên nuôi cấy tế bào đại thực bào J774 ở chuột đã cho thấy khả năng kích thích hoạt tính của inducible nitric oxide synthase (iNOS) ở cấp độ phiên mã.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
  • Tổng hợp VIP và Ro 25-1553
  • Tổng hợp dẫn xuất VIP bằng transglutaminase
  • Tinh sạch và đặc tính hóa các dẫn xuất VIP
  • Nuôi cấy dòng tế bào CHO
  • Chuẩn bị màng, nhận diện thụ thể và xác định adenylate cyclase
  • Đo lường oxit nitric
  • Đánh giá hoạt tính iNOS
  • RT-PCR
  • Kết quả
  • Sự phân bố điện tích và chuỗi đa axit amin trong các trình tự thụ thể
  • Phân tích thống kê
  • Thảo luận
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo