Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 231 KB

Giới thiệu nội dung

The Involvement Of Human Ribonucleases H1 And H2 In The Variation Of Response Of Cells To Antisense Phosphorothioate Oligonucleotides

Tác giả: Anneloor L. M. A. ten Asbroek, Marjon van Groenigen, Marleen Nooij and Frank Baas

Lĩnh vực: Khoa học sinh học, Sinh hóa học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này phân tích phản ứng của nhiều dòng tế bào người đối với việc xử lý bằng các oligo-deoxynucleotide đối nghĩa (ODN) nhắm vào RNA polymerase II, protein A và Ha-ras. Việc đưa ODN vào tế bào được thực hiện bằng phương pháp liposome hoặc điện xung, dẫn đến các vị trí khác nhau của ODN trong tế bào. Sự giảm mRNA đích do ODN gây ra thay đổi đáng kể giữa các dòng tế bào. Do vai trò thiết yếu của hoạt tính RNase H trong phản ứng này, RNase H đã được phân tích. Mức độ mRNA của RNase H1 và RNase H2 thay đổi đáng kể trong các dòng tế bào được khảo sát. Định vị trong tế bào của các enzyme, được đánh giá bằng protein huỳnh quang xanh lá cây, cho thấy RNase H1 có mặt khắp tế bào đối với tất cả các loại tế bào được phân tích, trong khi RNase H2 bị giới hạn trong nhân ở tất cả các tế bào trừ dòng tế bào ung thư tuyến tiền liệt 15PC3. Các chiết xuất toàn tế bào cho thấy hoạt tính cắt RNase H tương tự trong thử nghiệm lỏng in vitro, trái ngược với hiệu quả của ODN in vivo. Sự biểu hiện quá mức của RNase H2 không ảnh hưởng đến phản ứng với ODN in vivo. Dữ liệu của chúng tôi ngụ ý rằng hoạt tính RNase H in vivo không chỉ do hoạt tính được đánh giá trong ống nghiệm mà còn do một đặc tính nội tại của tế bào. RNase H1 có khả năng không phải là yếu tố chính trong việc phân hủy mRNA đích do ODN đối nghĩa gây ra. RNase H2 tham gia vào hoạt tính được đánh giá trong ống nghiệm. Sự hiện diện của các yếu tố đặc trưng cho từng loại tế bào ảnh hưởng đến hoạt tính và định vị của RNase H2 được gợi ý mạnh mẽ.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và Phương pháp
  • Kết quả
  • Thảo luận
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo