Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 17 trang
Dung lượng: 248 KB

Giới thiệu nội dung

Regulation of subunit S5a of the 26S proteasome

Tác giả: Yael Gus, Rotem Karni, and Alexander Levitzki

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Tế bào

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc khám phá các yếu tố mới có khả năng chống lại quá trình chết theo chương trình (apoptosis) và chịu sự điều hòa của oncoprotein c-Src. Một trong những yếu tố được xác định là tiểu đơn vị S5a của 26S proteasome. Nghiên cứu chỉ ra rằng S5a có khả năng cứu các tế bào Saos-2 khỏi quá trình apoptosis do chất ức chế Src là PP1 gây ra. Mức độ mRNA và protein của S5a bị giảm khi ức chế Src. Ngược lại, ở các dòng tế bào có hoạt tính Src cao, mức độ S5a lại tăng lên. Phân tích vùng promoter của S5a cho thấy nó phản ứng với nhiều tín hiệu và có vị trí liên kết cho yếu tố phiên mã Tcf/Lef-1. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng ẞ-catenin làm tăng đáng kể phiên mã từ promoter của S5a, và Lef-1 liên kết với vị trí này. Các kết quả này gợi ý rằng S5a được điều hòa ở cấp độ phiên mã trong quá trình apoptosis, và việc tăng cường S5a bởi các tín hiệu chống apoptosis có thể góp phần vào sự sống sót của tế bào.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Keywords
  • Correspondence
  • Abbreviations
  • Subunit S5a of the 26S proteasome
  • Results
  • Screen for antiapoptotic genes that are under the regulation of Src
  • S5a rescues Saos-2 cells from PP1-induced apoptosis
  • S5a expression is regulated by Src activity
  • Overexpression of S5a results in the accumulation of IKB
  • The S5a promoter responds to signaling proteins
  • A role for S5a in apoptosis?
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Cell culture and materials
  • Transient transfections
  • Identification of antiapoptotic target genes of Src by a genetic screen
  • HA-S5a rescue assays
  • Northern blotting
  • Immunoblotting
  • siRNA experiments
  • 20S proteasomal activity assay
  • Cloning of the S5a promoter region
  • Reporter assays
  • In vitro translation and DNA-binding analysis
  • Acknowledgements
  • References
  • Supplementary material