Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 16 trang
Dung lượng: 342 KB

Giới thiệu nội dung

Site-specific Phosphorylation of MCM4 During the Cell Cycle in Mammalian Cells

Tác giả: Yuki Komamura-Kohno, Kumiko Karasawa-Shimizu, Takako Saitoh, Michio Sato, Fumio Hanaoka, Shoji Tanaka, and Yukio Ishimi

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Tế bào học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc khám phá sự phosphoryl hóa đặc hiệu tại các vị trí trên protein MCM4 trong chu kỳ tế bào ở động vật có vú. Các nhà nghiên cứu đã phân tích sự phosphoryl hóa của MCM4 tại bảy vị trí Ser/Thr khác nhau bằng cách sử dụng các kháng thể đặc hiệu. Kết quả cho thấy sự phosphoryl hóa này có thể được phân loại thành hai nhóm: nhóm tăng cường mạnh mẽ trong pha G2 và M, và nhóm được phát hiện rõ ràng trong kỳ trung gian. Nghiên cứu cũng chỉ ra vai trò của các kinase phụ thuộc cyclin (CDK), cụ thể là CDK1 và CDK2, trong việc điều chỉnh sự phosphoryl hóa tại các vị trí này. Hơn nữa, các phân tích về sự phân bố của MCM4 phosphoryl hóa cho thấy các vị trí phosphoryl hóa khác nhau có ái lực khác nhau với chromatin và có thể đóng các vai trò riêng biệt trong chức năng của MCM trong chu kỳ tế bào.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Correspondence
  • Abstract
  • Introduction
  • Results
  • Characterization of antiphosphoMCM4 sera
  • Phosphorylation of MCM4 during the HeLa cell cycle
  • Cyclin-dependent protein kinase is involved in the phosphorylation of MCM4
  • Phosphorylated MCM4 on chromatin
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Cell culture and antibodies
  • ELISA
  • Preparation of cell fractions and western blotting
  • In vitro phosphorylation
  • Immunostaining
  • Microfluorometry
  • Image cytometry
  • Confocal laser scanning microscope
  • Electron microscope observation
  • Acknowledgements
  • References
  • Supplementary material