Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 13 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

Selection of Full-Length IgGs by Tandem Display on Filamentous Phage Particles and Escherichia Coli Fluorescence-Activated Cell Sorting Screening

Tác giả: Yariv Mazor, Thomas Van Blarcom, Sean Carroll, George Georgiou

Lĩnh vực: Hóa Kỹ Thuật Sinh Học, Công Nghệ Sinh Học Phân Tử

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này trình bày một hệ thống mới cho phép lựa chọn các kháng thể IgG toàn phần từ các thư viện kháng thể tái tổ hợp lớn bằng cách kết hợp hiển thị trên phage sợi với sàng lọc bằng phân tích tế bào huỳnh quang (FACS). Phương pháp này tận dụng hiển thị IgG trên các hạt phage sợi như một bước sàng lọc ban đầu để giảm kích thước thư viện, sau đó là sàng lọc FACS trên vi khuẩn E. coli. Hệ thống này đã chứng minh khả năng cho phép lựa chọn các binder kháng nguyên đặc hiệu với độ đa dạng cao mà không làm mất đi thông tin, đồng thời tận dụng lợi thế của FACS trong việc theo dõi và tối ưu hóa quá trình sàng lọc theo thời gian thực. Kỹ thuật này mở ra khả năng sàng lọc hiệu quả các thư viện kháng thể IgG lớn, cung cấp một phương pháp mạnh mẽ cho việc khám phá và phát triển các kháng thể trị liệu mới.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Mô hình hệ thống xác nhận
  • Sàng lọc thư viện bằng panning phage tuần tự và FACS
  • Sàng lọc bằng panning phage tuần tự
  • Sàng lọc thư viện bằng FACS
  • Phân tích
  • Thảo luận
  • Quy trình thực nghiệm
  • Dòng tế bào và plasmid
  • Sản xuất phage fUSE5-ZZ
  • Sản xuất fUSE5-ZZ-IgG
  • Phân tích liên kết của fUSE5-ZZ-IgG trong ELISA
  • Kỹ thuật panning phage để làm giàu fUSE5-ZZ-M18 IgG
  • Làm giàu IgG ái lực cao và ái lực trung bình bằng FACS phage tuần tự
  • Tài liệu tham khảo