SCREENING AND EXPRESSION OF A GENE ENCODING PROTEASE INHIBITOR PROTEIN OF MICROORGANISMS ASSOCIATED WITH THE SPONGE Spheciospongia vesparium COLLECTED FROM MIENTRUNG SEA, VIETNAM

SCREENING AND EXPRESSION OF A GENE ENCODING PROTEASE INHIBITOR PROTEIN OF MICROORGANISMS ASSOCIATED WITH THE SPONGE Spheciospongia vesparium COLLECTED FROM MIENTRUNG SEA, VIETNAM

Tác giả: Tran Thi Hong

Lĩnh vực: Biotechnology

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc sàng lọc và biểu hiện gen mã hóa protein ức chế protease từ vi sinh vật cộng sinh với bọt biển Spheciospongia vesparium, được thu thập từ biển Miền Trung, Việt Nam. Các protease inhibitors (PIs) có vai trò quan trọng trong nhiều lĩnh vực, đặc biệt là y học. Bọt biển và các vi sinh vật cộng sinh là nguồn tiềm năng để phát hiện các hợp chất có hoạt tính sinh học mới, bao gồm cả các peptide có khả năng ức chế protease. Tuy nhiên, phần lớn các vi sinh vật cộng sinh với bọt biển không nuôi cấy được, gây khó khăn cho việc khai thác chúng. Phương pháp metagenomics, kết hợp với thiết bị giải trình tự gen hiệu năng cao và các công cụ tin sinh học, cho phép phát hiện các gen và cụm gen mã hóa PIs từ các vi sinh vật không nuôi cấy được.

Luận án đã xây dựng cơ sở dữ liệu metagenome DNA của các vi sinh vật cộng sinh với bọt biển QT2 thu thập tại biển Quảng Trị. Kết quả thu được có ý nghĩa khoa học, đóng góp vào việc bảo tồn nguồn gen vi sinh vật biển Việt Nam và có tiềm năng ứng dụng thực tiễn. Gen PI-QT mã hóa PIs đã được xác định và biểu hiện thành công trong E. coli và P. pastoris. Hoạt tính kháng protease của protein biểu hiện đã được đánh giá, cho thấy protein PI-QT tái tổ hợp từ E. coli có hoạt tính kháng trypsin, kháng α-chymotrypsin, còn protein từ P. pastoris thể hiện hoạt tính ức chế protease đối với trypsin, α-chymotrypsin và thermolysin.

Mục lục chi tiết:

• CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN
• CHƯƠNG II. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• CHƯƠNG III. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN