Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: 419 KB

Giới thiệu nội dung

Schizosaccharomyces pombe Positive Cofactor 4 Stimulates Basal Transcription from TATA-Containing and TATA-less Promoters through Mediator and Transcription Factor IIA

Tác giả: Juan Contreras-Levicoy, Fabiola Urbina, và Edio Maldonado

Lĩnh vực: Sinh học Tế bào và Phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá vai trò của protein cofactor dương tính 4 (PC4) trong nấm men Schizosaccharomyces pombe (Sc. pombe) trong việc kích thích quá trình phiên mã cơ bản. Các tác giả đã xác định rằng PC4 có khả năng kích thích phiên mã cơ bản từ cả các promoter chứa TATA và không chứa TATA. Cơ chế hoạt động của PC4 được cho là thông qua tương tác với phức hợp Mediator và yếu tố phiên mã IIA (TFIIA), nhưng không phụ thuộc vào các yếu tố liên quan đến protein liên kết TATA (TAFs). PC4 cũng được chứng minh là có khả năng liên kết với DNA dạng sợi kép và sợi đơn, cũng như tương tác với các thành phần khác của bộ máy phiên mã như TBP, TFIIB, TFIIH và chất hoạt hóa phiên mã VP16. Nghiên cứu này làm sáng tỏ thêm vai trò của PC4 như một coactivator trong quá trình phiên mã, đặc biệt là ở giai đoạn hình thành phức hợp tiền khởi đầu phiên mã.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Correspondence
  • Abstract
  • Introduction
  • Results
  • Identification and purification of Sc. pombe PC4
  • Sc. pombe PC4 stimulates transcription from TATA-containing and TATA-less promoters
  • Stimulation of basal transcription by Sc. pombe PC4 is dependent on Mediator and independent of TAF
  • Sc. pombe PC4 stimulates basal transcription at the level of preinitiation complex formation
  • Sc. pombe PC4 stimulates transcription in a reconstituted in vitro transcription assay through Mediator and TFIIA
  • Sc. pombe PC4 has double- and single-stranded DNA-binding activity
  • PC4 can interact with components of the transcription machinery
  • Discussion
  • Materials and methods
  • Cloning of Sc. pombe PC4
  • Expression and purification of the Sc. pombe PC4 protein
  • Preparation of whole-cell Sc. pombe extracts
  • Purification of RNAPII and GTFs
  • Depletion of TFIID and Mediator from the Sc. pombe whole-cell extracts
  • Specific transcription assays
  • Immobilization of the transcription templates
  • DNA-binding assays
  • Protein-protein interactions
  • Acknowledgements
  • References