Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 6 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

Preliminary Molecular Characterization and Crystallization of Mitochondrial Respiratory Complex II from Porcine Heart

Tác giả: Xia Huo, Dan Su, Aojin Wang, Yujia Zhai, Jianxing Xu, Xuemei Li, Mark Bartlam, Fei Sun, and Zihe Rao

Lĩnh vực: Sinh hóa, Sinh học cấu trúc

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này trình bày chi tiết về quy trình chuẩn bị, xác định trình tự gen, xác định trình tự N-terminal và kết tinh phức hợp hô hấp ty thể II từ tim lợn. Phức hợp hô hấp ty thể II, hay succinate:ubiquinone oxidoreductase, là một phức hợp protein màng tích hợp quan trọng trong chu trình carboxylic tricarboxylic (chu trình Krebs) và hô hấp hiếu khí. Các tác giả đã thực hiện phân tích RT-PCR để đo trình tự gen của từng tiểu đơn vị phức hợp II, cũng như xác định tín hiệu peptide định vị ty thể N-terminal của mỗi tiểu đơn vị. Phức hợp II đã được chiết xuất từ tim lợn và tinh chế bằng phương pháp kết tủa amoni sulfat. Quá trình hòa tan sử dụng n-decyl-β-D-maltoside và ổn định bằng sucrose đã được áp dụng. Việc kết tinh được thực hiện với poly(ethylene glycol) 4000. Bài báo thảo luận về các yếu tố quan trọng cho việc chiết xuất, tinh chế và kết tinh phức hợp hô hấp ty thể II. Ngoài ra, các phương pháp thực nghiệm bao gồm chiết xuất, tinh chế và kết tinh phức hợp hô hấp ty thể II từ tim lợn, cũng như thiết kế mồi, phiên mã ngược và PCR cũng được mô tả chi tiết.

Mục lục chi tiết:

– Keywords
– Correspondence
– The mitochondrial respiratory complex II, or succinate:ubiquinone oxidoreductase, is an integral membrane protein complex…
– Mitochondria are cellular organelles of prokaryotic origin that are found in almost all eukaryotic cells…
– Abbreviations
– Results and Discussion
– The mitochondrial respiratory complex II preparation was extracted and purified from porcine heart…
– Fig. 1. SDS-PAGE analysis of the crystallization preparation and the crystal of complex II…
– Fig. 2. The complex II crystals…
– Fig. 3. A typical X-ray diffraction pattern from a native mitochondrial complex II crystal.
– Table 1. Data collection statistics. SAD, single-wavelength anomalous diffraction.
– Experimental procedures
– Extraction, purification and crystallization of mitochondrial complex II from porcine heart
– Primer design, reverse transcription and the PCR
– N-terminal sequence for signal peptide
– Acknowledgements
– References
– Supplementary material