Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Nghiên cứu vai trò của gen ABCC4 liên quan đến rối loạn tự kỷ bằng mô hình ruồi giấm

Nghiên cứu chức năng của gen ABCC4 liên quan đến rối loạn tự kỷ bằng mô hình ruồi giấm

Tác giả: Trần Quốc Đạt

Lĩnh vực: Sinh học thực nghiệm

Nội dung tài liệu:

Luận văn này tập trung nghiên cứu về mối liên hệ giữa gen ABCC4 và rối loạn phổ tự kỷ (ASD) thông qua việc sử dụng mô hình ruồi giấm. ASD là một tình trạng rối loạn hành vi nghiêm trọng, đặc trưng bởi các khiếm khuyết trong tương tác xã hội, phát triển ngôn ngữ và hành vi cứng nhắc, lặp lại. Nghiên cứu này sử dụng ruồi giấm, một mô hình sinh vật có nhiều ưu điểm như hệ gen tương đồng với người, vòng đời ngắn, và dễ dàng trong thao tác di truyền, để khám phá vai trò sinh học của gen ABCC4 trong rối loạn tự kỷ. Các mục tiêu chính bao gồm việc giảm biểu hiện gen ABCC4 (knockdown) trên mô hình ruồi giấm và phân tích các biểu hiện hành vi, cấu trúc thần kinh cơ (NMJ) của ruồi, từ đó làm sáng tỏ cơ chế phân tử của bệnh và tiềm năng ứng dụng trong sàng lọc thuốc.

Mục lục chi tiết:

• Mở đầu
• CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 1.1. Tổng quan về hội chứng rối loạn phổ tự kỷ
• 1.1.1. Chẩn đoán
• 1.1.2. Nguyên nhân
• 1.1.3. Điều trị
• 1.2. Tổng quan về ruồi giấm
• 1.2.1. Chu kỳ vòng đời
• 1.2.2. Hệ gen của ruồi giấm
• 1.3. Ứng dụng mô hình ruồi giấm trong nghiên cứu
• 1.4. Hệ thống kiểm soát biểu hiện gen GAL4-UAS và ứng dụng trong nghiên cứu mô hình ruồi giấm
• 1.4.1. Hệ thống GAL4/UAS
• 1.4.2. Phương pháp knockdown một gen bằng kỹ thuật RNAi và biểu hiện gen knockdown bằng hệ thống GAL4/UAS
• 1.5. Họ gen ABC và gen ABCC4
• 1.5.1. Tổng quan về họ gen ABC
• 1.5.2. Gen ABCC4
• 1.6. Ứng dụng mô hình ruồi giấm trong nghiên cứu rối loạn tự kỷ
• CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Đối tượng nghiên cứu
• 2.2. Nguyên vật liệu, hoá chất và thiết bị
• 2.2.1. Nguyên vật liệu và hoá chất
• 2.2.2. Dụng cụ và thiết bị
• 2.3. Phương pháp nghiên cứu
• 2.3.1 Phương pháp lai tạo dòng ruồi giấm knockdown biểu hiện dABCC4 tại mô não của ruồi
• 2.3.2. Phương pháp đánh giá biểu hiện của protein ABCC4 tại mô não ruồi giấm bằng kỹ thuật western blotting
• 2.3.3. Đánh giá khả năng vận động của ruồi giấm bằng thí nghiệm leo trèo
• 2.3.4. Phương pháp đánh giá khả năng tương tác xã hội
• 2.3.5. Phương pháp đánh giá nhịp sinh học của ruồi giấm (activity assay)
• 2.3.6. Phương pháp đánh giá tuổi thọ của ruồi giấm (viability assay)
• 2.3.7. Xác định sự thay đổi trong cấu trúc mối nối thần kinh cơ bằng phương pháp nhuộm miễn dịch huỳnh quang
• 2.3.8. Phân tích kết quả
• CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 3.1. So sánh mức độ tương đồng giữa protein ABCC4 của người và ruồi giấm
• 3.2. Kết quả đánh giá mức độ biểu hiện protein ABCC4 tại mô não ruồi giấm
• 3.3. Kết quả đánh giá khả năng vận động và tương tác ở ruồi trưởng thành
• 3.4. Kết quả xác định nhịp sinh học của ruồi giấm
• 3.5. Kết quả xác định sự thay đổi trong cấu trúc mối nối thần kinh cơ (neuromuscular junction-NMJ) của ruồi giấm bằng phương pháp nhuộm miễn dịch huỳnh quang
• 3.6. Kết quả đánh giá tuổi thọ của ruồi giấm
• KẾT LUẬN
• Tài liệu tham khảo