Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 13 trang
Dung lượng: 251 KB

Giới thiệu nội dung

Mutations in the C-terminal domain of ALSV (Avian Leukemia and Sarcoma Viruses) integrase alter the concerted DNA integration process in vitro

Tác giả: Karen Moreau, Claudine Faure, Sébastien Violot, Gérard Verdier, Corinne Ronfort

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Vi rút học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào vai trò của miền C-terminal của enzyme integrase (IN) trong quá trình tích hợp DNA của virus ALSV (Avian Leukemia and Sarcoma Viruses) vào DNA của tế bào chủ. Các nhà khoa học đã tạo ra các chủng đột biến IN và phân tích khả năng của chúng trong việc thực hiện quá trình tích hợp DNA theo cả hai cách: tích hợp đồng thời (concerted integration) và tích hợp không đồng thời (non-concerted integration) trong một thử nghiệm in vitro. Kết quả chỉ ra rằng các đột biến tại vùng tiếp giáp hai phân tử IN (dimer interface) có ảnh hưởng lớn nhất đến hoạt động của enzyme. Cụ thể, đột biến L240A làm giảm hiệu quả tích hợp và sự dimer hóa của IN. Các đột biến khác như V239A, V249A, K266A chủ yếu thúc đẩy quá trình tích hợp không đồng thời. Nghiên cứu cũng nhấn mạnh vai trò quan trọng của các axit amin tại miền C-terminal trong cấu trúc, quá trình dimer hóa và sự tích hợp đồng thời DNA của virus.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và Phương pháp (bao gồm DNA manipulation, Purification of proteins, Integration reaction, Gel analysis of the integration reaction, Cloning and sequencing of two-ended integration products, Size exclusion chromatography, Protein-protein cross-linking)
  • Kết quả (Reconstitution of the concerted DNA integration assay in vitro, Analysis of integration efficiency of IN mutants, Molecular characterization of integration products, Multimeric forms of IN proteins)
  • Thảo luận
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo