Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 12 trang
Dung lượng: 278 KB

Giới thiệu nội dung

Monoterpene Biosynthesis in Lemon (Citrus limon): cDNA Isolation and Functional Analysis of Four Monoterpene Synthases

Tác giả: Joost Lücker, Mazen K. El Tamer, Wilfried Schwab, Francel W. A. Verstappen, Linus H. W. van der Plas, Harro J. Bouwmeester, và Harrie A. Verhoeven

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Khoa học thực vật

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân lập và phân tích chức năng của bốn gen mã hóa enzyme monoterpene synthase từ cây chanh (Citrus limon). Các enzyme này đóng vai trò thiết yếu trong việc sản xuất các hợp chất monoterpene, vốn có nhiều trong vỏ quả chanh và là thành phần quan trọng trong tinh dầu chanh. Bằng cách sử dụng phương pháp giải trình tự ngẫu nhiên trên thư viện cDNA từ vỏ quả chanh non, các nhà nghiên cứu đã xác định được bốn gen mới thuộc họ tpsb. Các gen này đã được biểu hiện chức năng trong vi khuẩn Escherichia coli. Kết quả cho thấy các enzyme được mã hóa có khả năng tổng hợp (+)-limonene, (-)-β-pinene và γ-terpinene. Nghiên cứu cũng làm rõ các đặc tính hoạt động của enzyme, bao gồm tối ưu pH, sự phụ thuộc vào ion kim loại và ái lực với cơ chất. Các enzyme được xác định có khả năng giải thích sự hình thành phần lớn các hợp chất monoterpene trong tinh dầu chanh.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
  • Chưng cất lôi cuốn bằng hơi nước vỏ chanh
  • Phân lập RNA, xây dựng thư viện cDNA, giải trình tự ngẫu nhiên và sàng lọc thư viện
  • Kiểm tra khối lượng lớn
  • Phân lập và giải trình tự DNA
  • Biểu hiện cDNA trong E. coli
  • Phân tích GC-MS
  • Phân tích các enzyme tái tổ hợp đã biểu hiện chức năng
  • Phân tích đồng phân bằng MDGC-MS
  • Phân tích trình tự
  • Biểu hiện chức năng của các monoterpene synthase tiềm năng trong E. coli
  • Kết quả
  • Hàm lượng monoterpene trong quả chanh
  • Phân lập cDNA và giải trình tự
  • Phân tích trình tự
  • Biểu hiện chức năng của các monoterpene synthase tiềm năng trong E. coli
  • Thảo luận
  • Tài liệu tham khảo
  • Lời cảm ơn