Báo cáo khoa học: Mass spectrometric detection of tyrosine sulfation in human pancreatic trypsinogens, but not in tumor-associated trypsinogen

Mass spectrometric detection of tyrosine sulfation in human pancreatic trypsinogens, but not in tumor-associated trypsinogen

Tác giả: Outi Itkonen, Jari Helin, Juhani Saarinen, Nisse Kalkkinen, Konstantin I. Ivanov, Ulf-Håkan Stenman, Leena Valmu

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử.

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định sự sulfat hóa của tyrosine (Tyr154) trong trypsinogen-1 và -2 của tuyến tụy người, cũng như sự vắng mặt của sửa đổi này trong trypsinogen liên quan đến khối u. Bằng các kỹ thuật như phổ khối lượng ion hóa điện trường (ESI-MS) và phân tích peptide, các nhà nghiên cứu đã chứng minh rằng Tyr154 của trypsinogen tuyến tụy được sulfat hóa, trong khi Tyr154 của trypsinogen liên quan đến khối u thì không. Sự khác biệt này được cho là nguyên nhân dẫn đến các đặc tính khác biệt về điện tích, ái lực liên kết chất ức chế và hoạt tính xúc tác giữa hai loại trypsinogen. Nghiên cứu cũng thảo luận về vai trò tiềm năng của sulfat hóa tyrosine trong các tương tác protein-protein và hoạt động của enzyme.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Mass spectrometric detection of tyrosine sulfation in human pancreatic trypsinogens, but not in tumor-associated trypsinogen
• Keywords
• Correspondence
• Results
• Identification of the 80 Da modification in pancreatic trypsinogen-1 and -2
• Investigation of Tyr154 phosphorylation in pancreatic trypsinogens
• Lack of sulfation in tumor-associated trypsinogen-2
• Discussion
• Experimental procedures
• Materials and samples
• Purification of trypsinogens
• Alkylation and digestion of trypsinogens
• Mass spectrometry
• Data analysis
• N-terminal sequence analysis
• Immunoblotting
• Acknowledgements
• References