Báo cáo khoa học: Isolation and characterization of four type 2 ribosome inactivating pulchellin isoforms from Abrus pulchellus seeds

Isolation and Characterization of Four Type 2 Ribosome-Inactivating Pulchellin Isoforms from Abrus Pulchellus Seeds

Tên đề tài: Isolation and characterization of four type 2 ribosome-inactivating pulchellin isoforms from Abrus pulchellus seeds

Tác giả: Priscila V. Castilho, Leandro S. Goto, Lynne M. Roberts, and Ana Paula U. Araújo

Lĩnh vực: Sinh hóa, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân lập và đặc tính hóa bốn dạng isoform của pulchellin, một loại protein bất hoạt ribosome loại 2, từ hạt của cây Abrus pulchellus. Các isoform này, được đặt tên là PI, PII, PIII và PIV, đã được phân lập bằng các phương pháp sắc ký. Nghiên cứu đã đánh giá độc tính và khả năng liên kết với đường của chúng, cho thấy sự khác biệt về độc tính và đặc điểm cấu trúc thứ cấp. Sự khác biệt này được cho là do những thay đổi tinh tế trong chuỗi B, có thể ảnh hưởng đến tương tác với bề mặt tế bào và quá trình hấp thụ độc tố.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Results
• Nomenclature of the toxic pulchellin lectins
• Characterization of four pulchellin isoforms
• Secondary structure of the pulchellin isoforms and melting temperature
• Sequence comparison of pulchellins from A. pulchellus seeds
• In vivo toxicity
• Agglutination and carbohydrate-binding of the B-chains
• Discussion
• Experimental procedures
• Abrus pulchellus seeds
• Isolation of pulchellin isoforms
• Isoelectric focusing
• CD measurements
• cDNA cloning and amino acid sequence dedution of the isoforms from A. pulchellus
• DNA sequencing
• Amino acid sequence analysis
• LC-MS/MS analysis of tryptic peptides
• Cytotoxicity assays
• Toxicity to mice
• Hemagglutination and hemagglutination-inhibition assays
• Acknowledgements
• References