Báo cáo Y học: Identification of ectopic anionic trypsin I in rat lungs potentiating pneumotropic virus infectivity and increased enzyme level after virus infection

Identification of Ectopic Anionic Trypsin I in Rat Lungs Potentiating Pneumotropic Virus Infectivity and Increased Enzyme Level After Virus Infection

Tác giả: Takae Towatari, Mikiko Ide, Kumiko Ohba, Yuusuke Chiba, Meiko Murakami, Mayumi Shiota, Miki Kawachi, Hiroshi Yamada and Hiroshi Kido

Lĩnh vực: Enzyme Chemistry, Institute for Enzyme Research, University of Tokushima, Japan

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định và tinh sạch một protease xử lý dạng anionic trypsin I ectopi trong phổi chuột nhắt, được tăng cường bởi sự nhiễm virus Sendai. Protease này có khả năng xử lý tiền chất glycoprotein dung hợp của virus và tăng cường khả năng lây nhiễm của virus Sendai trong ống nghiệm. Các nghiên cứu hóa mô miễn dịch cho thấy protease này được định vị trong các tế bào mô đệm ở vùng quanh phế quản, không phải từ các tế bào viêm nhiễm. Kết quả cho thấy anionic trypsin I ectopi trong phổi chuột nhắt, được gây ra bởi nhiễm virus, có thể đóng vai trò là một protease xử lý mới trong việc thúc đẩy sự lây lan của virus trong phổi.

Mục lục chi tiết:

• Identification of ectopic anionic trypsin I in rat lungs potentiating pneumotropic virus infectivity and increased enzyme level after virus infection
• Extracellular cleavage of virus envelope fusion glycoproteins by host cellular proteases is a prerequisite for the infectivity of mammalian and nonpathogenic avian influenza viruses, and Sendai virus.
• Post-translational proteolytic cleavage of precursors of the envelope fusion glycoproteins of RNA viruses, such the influenza A and Sendai viruses, is indispensable for virus entry into the host cells.
• EXPERIMENTAL PROCEDURES
• Materials
• Purification of rat lung trypsin-like protease induced by Sendai virus infection
• Enzyme, inhibitor and protein assays
• Processing activity toward F0 of Sendai and HA of human influenza A viruses
• Amino-acid sequence analysis
• Detection of gelatinolytic activity on SDS/PAGE and Western immunoblotting
• Preparations of antibodies and immobilized affinity column
• Immunohistochemistry
• RESULTS
• A trypsin-like processing protease induced by Sendai virus infection in rat lungs
• Purification of a trypsin-like processing protease from rat lungs infected with Sendai virus
• Substrate specificity
• Inhibitor specificity
• Identification of the purified enzyme as anionic trypsin I in rat lungs
• Immunohistochemical staining
• DISCUSSION
• REFERENCES