Báo cáo khoa học: Identification of a novel alternative splicing variant of RGS5 mRNA in human ocular tissues

Identification of a Novel Alternative Splicing Variant of RGS5 mRNA in Human Ocular Tissues

Tác giả: Yanbin Liang, Chen Li, Victor M. Guzman, William W. Chang, Albert J. Evinger III, Dyna Sao and David F. Woodward

Lĩnh vực: Department of Biological Science, Allergan, Inc., Irvine, CA, USA

Nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này báo cáo việc xác định một biến thể cắt nối thay thế mới của mRNA RGS5 trong các mô mắt của con người. Biến thể này, được gọi là RGS5s, được mã hóa bởi một protein RGS5 với sự thiếu hụt N-terminal 108 axit amin. Nghiên cứu đã điều tra sự phân bố mô, định vị tế bào và thay đổi chức năng của RGS5s. Kết quả cho thấy RGS5s được biểu hiện cao ở thể mi và vùng lưới của mắt, và có đặc điểm loài. Về mặt chức năng, RGS5s chủ yếu định vị trong bào tương và có thể hoạt động như một chất điều hòa âm tính nội sinh của RGS5 trong tín hiệu thụ thể Gaq. Nghiên cứu này cung cấp những hiểu biết mới về vai trò của các protein RGS trong các quá trình sinh lý, đặc biệt là trong điều hòa tín hiệu tế bào và có thể cung cấp manh mối cho các phương pháp điều trị bệnh tăng nhãn áp.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Introduction
• Results
• Identification of alternative splicing of RGS5 mRNA in human, monkey and rat ocular tissues
• Tissue distribution of RGS5s
• Cellular localization of RGS5 and RGS5s proteins
• RGS5s act as an endogenous negative regulator of RGS5 in Gaq-coupled receptors
• RGS5s antagonized Gai coupled CB-1 receptor
• Discussion
• Materials and methods
• Cell cultures
• Isolation of total RNA and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR)
• Plasmids and transfection
• Calcium signal studies on the FLIPRTM
• Western blotting analysis
• Stimulation of MAP kinase phosphorylation and immunoblots
• References