Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 11 trang
Dung lượng: 228 KB

Giới thiệu nội dung

Functional Characterization of Hepatocyte Nuclear Factor-4α Dimerization Interface Mutants

Tên đề tài: Functional characterization of hepatocyte nuclear factor-4α dimerization interface mutants

Tác giả: Eleni Aggelidou, Panagiota Iordanidou, Constantinos Demetriades, Olga Piltsi, Margarita Hadzopoulou-Cladaras

Lĩnh vực: Genetics, Development and Molecular Biology, Developmental Biology, School of Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tích chức năng của các đột biến tại giao diện hai phân tử (dimerization interface) của yếu tố phiên mã nhân gan yếu tố 4 alpha (HNF-4α). HNF-4α là một thành viên của siêu họ thụ thể hạt nhân, hoạt động như một homodimer, và sự dimer hóa này đóng vai trò quan trọng trong các khía cạnh chức năng của thụ thể như gắn DNA, ổn định protein, gắn phối tử và tương tác với các coactivator. Nghiên cứu sử dụng dữ liệu cấu trúc tinh thể để xác định các tương tác ion quan trọng trong giao diện homodimer của miền gắn phối tử (LBD) và giới thiệu các đột biến điểm nhằm phá vỡ các tương tác này. Các mutant sau đó được phân tích về khả năng phiên mã, tương tác với coactivator, gắn DNA và dimer hóa. Kết quả cho thấy các đột biến tại một số vị trí nhất định không ảnh hưởng đến khả năng gắn DNA và dimer hóa, tuy nhiên, đột biến tại vị trí R324L đã làm mất hoàn toàn hoạt tính phiên mã và khả năng tuyển dụng coactivator, nhấn mạnh vai trò của dạng đột biến đối với chức năng của HNF-4α.

Mục lục chi tiết:

  • Keywords
  • Correspondence
  • Abstract
  • Introduction
  • Results
  • Experimental Procedures
  • Plasmid constructions
  • Cell transfections and chloramphenicol acetyltransferase assays
  • Electrophoretic mobility shift assay
  • Coimmunoprecipitation
  • Western blotting assays
  • Copurification of biotin-tagged PGC-1 and HNF-4α from cell extracts
  • Acknowledgements
  • References