Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 14 trang
Dung lượng: 312 KB

Giới thiệu nội dung

Functional Characterization of Drosophila melanogaster PERK Eukaryotic Initiation Factor 2α (elF2α) Kinase

Tác giả: Natalia Pomar, Juan J. Berlanga, Sonsoles Campuzano, Greco Hernández, Mónica Elías, César de Haro

Lĩnh vực: Sinh học Phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định chức năng của Drosophila melanogaster PERK (DPERK), một kinase khởi đầu eukaryotic factor 2α (eIF2α). DPERK được xác định là một kinase eIF2α có hoạt tính tự phosphoryl hóa và có khả năng thay thế chức năng của GCN2 ở nấm men. Biểu hiện của DPERK được điều hòa theo sự phát triển, tập trung chủ yếu ở tế bào ruột và tế bào mầm trong giai đoạn phôi. Các phân tích cho thấy DPERK cư trú trong mạng lưới nội chất (ER) và hoạt động của nó có thể được điều hòa bởi stress ER, tương tự như PERK ở động vật có vú. Nghiên cứu cũng khám phá vai trò của miền N-terminal trong quá trình oligomer hóa và chức năng của DPERK, đồng thời nhấn mạnh sự bảo tồn cấu trúc và chức năng giữa DPERK và PERK ở động vật có vú, gợi ý một cơ chế tương tự để truyền tín hiệu stress ER.

Mục lục chi tiết:

  • Experimental procedures
  • Materials
  • Cloning and sequence analysis
  • Northern blot analysis
  • RT-PCR
  • Whole-mount embryo RNA in situ hybridization
  • Results
  • Molecular characterization of the D. melanogaster PERK gene
  • Developmental expression of DPERK
  • DPERK phosphorylates Drosophila elF2a at S50 in vitro and mediates translational control in S. cerevisiae
  • DPERK, but not DGCN2, is activated by ER stress
  • Localization and elF2a kinase activity of DPERK – the role of the N-terminal domain
  • Expression and activity of DPERK mutants
  • The N-terminal regulatory domain is required for the oligomerization of DPERK
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References