Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 10 trang
Dung lượng: 191 KB

Giới thiệu nội dung

Exploration of the Diaphorase Activity of Neutrophil NADPH Oxidase

Tác giả: Alexandra Poinas, Jacques Gaillard, Pierre Vignais, Jacques Doussiere

Lĩnh vực: Biochemistry, Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này xem xét lại sự tương tác của p-iodonitrotetrazolium (INT) với các thành phần redox của flavocytochrome b trong NADPH oxidase của bạch cầu trung tính. Bằng cách sử dụng các chất ức chế đặc hiệu, nghiên cứu chỉ ra rằng INT phản ứng ưu tiên với heme hơn là với FAD, đặt ra câu hỏi về tính đặc hiệu của nó như một đầu dò cho hoạt động diaphorase. Kết quả cho thấy INT có thể trực tiếp oxy hóa heme b đã khử, gợi ý rằng nó tương tác với các thành phần heme của flavocytochrome b.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Experimental Procedures
  • Materials
  • Biological preparations
  • Preparation of INT radical
  • Assay of oxidase and INT diaphorase activities
  • Optical spectra
  • EPR spectra
  • Results
  • Effect of NADPH oxidase activation and oxygen on the rates of INT reductase and O2 production
  • Characterization of the INT radical
  • Compared effects of the two heme inhibitors, benzylimidazole and bipyridyl on the optical and EPR spectra of hemin and flavocytochrome b
  • Dependence of NADPH oxidase inhibition by 5-deaza FAD on the activation state of flavocytochrome b
  • Effect of 5-deaza FAD and heme inhibitors on the reduced state of flavocytochrome b in activated neutrophil membranes
  • Kinetics of inhibition of the oxidase activity by INT and bipyridyl
  • INT-dependent reoxidation of dithionite-reduced heme b in flavocytochrome b and dithionite-reduced hemin
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References