Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 15 trang
Dung lượng: 257 KB

Giới thiệu nội dung

ERS1 Encodes a Functional Homologue of the Human Lysosomal Cystine Transporter

Tác giả: Xiao-Dong Gao, Ji Wang, Sabine Keppler-Ross, Neta Dean

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Di truyền học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá mối liên hệ chức năng giữa gen ERS1 của nấm men và gen CTNS của người, vốn mã hóa cho protein vận chuyển cystine trong lysosome. Bệnh cystinosis, một rối loạn di truyền, là hậu quả của sự tích tụ cystine trong lysosome do đột biến gen CTNS. Nghiên cứu sử dụng nấm men như một hệ thống mô hình để điều tra chức năng của CTNS và các yếu tố liên quan đến lysosome. ERS1, một protein ở vacuole của nấm men, khi bị mất chức năng sẽ gây nhạy cảm với hygromycin B. Gen CTNS của người có khả năng bổ sung chức năng cho đột biến ers1Δ, cho thấy ERS1 và CTNS là các gen tương đồng chức năng. Nghiên cứu cũng xác định các gen mới, MEH1 và Gtr1, đóng vai trò trong việc điều hòa chức năng vacuole và sự liên kết của chúng với ERS1 và CTNS.

Mục lục chi tiết:

  • ERS1 encodes a functional homologue of the human lysosomal cystine transporter
  • Correspondence
  • Keywords
  • Abbreviations
  • Cystinosis is a lysosomal storage disease whose hallmark is the accumulation of cystine in the lysosome
  • A number of different mutations have been characterized from cystinosis patients, almost all of which map to the CTNS gene
  • ERS1 and CTNS are functional homologues
  • Results
  • The mammalian CTNS lysosomal H+-driven transporter encodes a functional homologue of ERS1
  • CTNS mutants fail to complement ers1 strains
  • Ers1 protein localizes in the endosomes and vacuole
  • Identification of MEH1 as a high copy suppressor of ers1Δ
  • MEH1 displays genetic interactions with ERS1 and localizes to the vacuole
  • Meh1 is required for vacuolar acidification
  • Myristylation of Meh1 is required for its vacuolar association
  • Meh1 recruits the small GTPase Gtr1 to the vacuolar membrane
  • Discussion
  • Experimental procedures
  • Yeast strains and media
  • Plasmid constructions
  • Analysis of GFP-fusion proteins and vacuolar fluorescent staining
  • Subcellular fractionation, western blotting and immunoprecipitation
  • Screen for multicopy suppressors of the hygB sensitivity of ers1Δ
  • Acknowledgement
  • References