Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 7 trang
Dung lượng: 151 KB

Giới thiệu nội dung

Dinucleoside polyphosphates stimulate the primer independent synthesis of poly(A) catalyzed by yeast poly(A) polymerase

Tác giả: María A. Günther Sillero, Anabel de Diego, Hugo Osorio and Antonio Sillero

Lĩnh vực: Bioquímica

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày các thuộc tính mới của quá trình tổng hợp poly(A) không cần mồi được xúc tác bởi enzyme poly(A) polymerase từ nấm men. Khác với enzyme từ E. coli, enzyme thương mại từ nấm men không thể adenylate đầu 3′-OH của nucleosides, nucleotides hoặc dinucleoside polyphosphates. Tuy nhiên, trong sự hiện diện của ATP, các dinucleotides đã kích hoạt đáng kể tốc độ của enzyme, với thứ tự hoạt hóa giảm dần là Gp4G, Gp3G, Ap6A, Gp2G, Ap4A, Ap2A, Gp5G, Ap5A, Ap3A. Các dinucleoside polyphosphates không ảnh hưởng đến tốc độ tối đa (Vmax) của phản ứng, nhưng làm thay đổi các giá trị nH và Km(S0.5). Các phát hiện này cho thấy nồng độ dinucleoside polyphosphates thấp cũng có thể có tác dụng kích hoạt đáng kể đối với quá trình tổng hợp poly(A) bởi enzyme. Điều này gợi ý mối liên hệ tiềm năng giữa dinucleoside polyphosphates và các enzyme xúc tác cho quá trình tổng hợp và/hoặc sửa đổi DNA hoặc RNA.

Mục lục chi tiết:

  • Novel properties of the primer independent synthesis of poly(A), catalyzed by the yeast poly(A) polymerase
  • Keywords: Ap4A; Gp4G; dinucleoside polyphosphates; yeast poly(A) polymerase.
  • MATERIALS AND METHODS
  • Enzyme assays
  • TLC
  • HPLC
  • RESULTS
  • Comparison of poly(A) polymerase from E. coli and yeast
  • Effect of diguanosine polyphosphates on yeast poly(A) polymerase
  • Stimulation of poly(A) synthesis as a function of diguanosine diphosphate (Gp2G) concentration
  • Relative activity of GpGs as effectors of the synthesis of poly(A)
  • Effect of diadenosine polyphosphates on poly(A) polymerase
  • Dinucleoside polyphosphates diminish the Km (S0.5) value for ATP in the primer independent synthesis of poly(A)
  • DISCUSSION
  • ACKNOWLEDGEMENTS
  • REFERENCES