Báo cáo khoa học: Conformational stability of 17b-hydroxysteroid dehydrogenase from the fungus Cochliobolus lunatus

Conformational Stability of 17β-Hydroxysteroid Dehydrogenase from the Fungus Cochliobolus lunatus

Tác giả: Nataša Poklar Ulrih and Tea Lanišnik Rižner

Lĩnh vực: Biochemistry, Molecular Biology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khảo sát sự thay đổi cấu trúc của enzyme 17β-hydroxysteroid dehydrogenase (17β-HSDcl) từ nấm Cochliobolus lunatus dưới các điều kiện khác nhau như pH, nhiệt độ, nồng độ muối, urea, guanidine hydrochloride và sự gắn kết với coenzyme NADPH. Kết quả cho thấy enzyme tồn tại ở dạng dimer bền ở pH trung tính và nhiệt độ nhất định. Các tác nhân gây biến tính như urea và guanidine hydrochloride làm biến đổi cấu trúc enzyme ở nồng độ thấp. Sự gắn kết với NADPH gây ra những thay đổi cấu trúc cục bộ nhưng không ảnh hưởng đáng kể đến độ bền nhiệt của protein. Nghiên cứu cung cấp cái nhìn sâu sắc về sự ổn định cấu trúc và hành vi biến tính của 17β-HSDcl, góp phần hiểu rõ hơn về các enzyme tương tự trong siêu họ SDR.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Abstract
• Introduction
• Results
• Discussion
• Experimental procedures
• Materials
• Solutions
• Recombinant 17β-HSDcl
• Enzymatic assay
• Denaturation studies
• UV spectrophotometry
• CD
• pH measurements
• Native PAGE
• SDS/PAGE
• Electrophoretic titration analysis
• Acknowledgements
• References