Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 13 trang
Dung lượng: 306 KB

Giới thiệu nội dung

Characterization of the cofactor-independent phosphoglycerate mutase from Leishmania mexicana mexicana

Tác giả: Daniel G. Guerra, Didier Vertommen, Linda A. Fothergill-Gilmore, Fred R. Opperdoes, and Paul A. M. Michels

Lĩnh vực: Biochemistry, Parasitology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định đặc tính của enzyme phosphoglycerate mutase (PGAM) độc lập với cofactor (i-PGAM) từ ký sinh trùng Leishmania mexicana. Enzyme này được xác định là chỉ tồn tại trong bào tương của ký sinh trùng và không bị ảnh hưởng bởi 2,3-bisphosphoglycerate. Các nhà nghiên cứu đã thành công trong việc tạo ra một hệ thống biểu hiện vi khuẩn tiện lợi để sản xuất và tinh sạch enzyme, đồng thời thực hiện các phân tích chi tiết về đặc tính động học, sự phụ thuộc vào ion kim loại và phản ứng với các chất biến đổi hóa học. Kết quả cho thấy các histidine trong trung tâm hoạt động đóng vai trò quan trọng trong việc phối hợp các ion kim loại, và một số trong số chúng nhạy cảm với biến đổi hóa học. Nghiên cứu cũng gợi ý về khả năng thiết kế các chất ức chế dựa trên chất nền để phát triển các loại thuốc chọn lọc chống lại ký sinh trùng.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Materials and Methods
  • Experimental procedures
    • Growth, harvesting and fractionation of parasites
    • Enzyme assays
    • Library screening, subcloning and sequencing
  • Results
    • PGAM activity in L. mexicana
    • Cloning and sequence of LmPGAM
    • Bacterial production and purification of LmPGAM
    • Protein stability
    • Kinetic parameters
    • pH optima
    • Effect of anions
    • Requirement for metal ions
    • Chemical modification of histidines
    • Identification of modified residues
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References