C-terminal truncated cannabinoid receptor 1 coexpressed with G protein trimer in Sf9 cells exists in a precoupled state and shows constitutive activity

C-Terminal Truncated Cannabinoid Receptor 1 Coexpressed With G Protein Trimer in Sf9 Cells Exists in a Precoupled State and Shows Constitutive Activity

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này điều tra sự tồn tại của dạng tiền kết hợp (precoupled form) của thụ thể cannabinoid 1 (CB1) bị cắt cụt ở đầu C và bộ ba protein G trong hệ thống biểu hiện tế bào côn trùng dị thể. CB1 bị cắt cụt cho thấy mức độ sản xuất cao hơn so với thụ thể có chiều dài đầy đủ. Bằng kỹ thuật cộng hưởng năng lượng huỳnh quang (FRET), các nhà nghiên cứu đã phát hiện ra sự cùng định vị của CB1 bị cắt cụt và protein Ga_i1β¹γ². Các thử nghiệm gắn GTPγS trên màng tế bào Sf9 cho thấy thụ thể có thể chủ động kích hoạt protein G_iα1 ngay cả khi không có chất chủ vận. Một chất đối kháng đặc hiệu với CB1 đã ức chế hoạt động tự phát này. Kết quả nghiên cứu cũng chứng minh rằng phức hợp thụ thể và protein G có thể được hòa tan và đồng miễn dịch kết tủa, cho thấy tính ổn định của phức hợp trong dung dịch tẩy rửa. Hệ thống này có thể được sử dụng để sản xuất đủ số lượng phức hợp protein cho các nghiên cứu cấu trúc.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Lĩnh vực
• Kết quả
• Thảo luận
• Quy trình thực nghiệm
• Tài liệu tham khảo