Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 333 KB

Giới thiệu nội dung

TÁCH DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA TIỂU ĐƠN VỊ P66 CỦA ENZYME PHIÊN MÃ NGƯỢC CỦA VIRUS HIV-1

Tác giả: Phan Trọng Hoàng, Ngô Văn Trường, Lê Văn Sơn, Lê Trần Bình, Chu Hoàng Hà

Lĩnh vực: Viện Công nghệ sinh học, Trường Đại học Bách khoa Đà Nẵng

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc tách dòng và biểu hiện gen mã hóa tiểu đơn vị p66 của enzyme phiên mã ngược (RT) của virus HIV-1 trong hệ thống E. coli. Enzyme RT của HIV-1 là một heterodimer gồm hai tiểu đơn vị p66 và p51, đóng vai trò trung tâm trong quá trình nhân lên của virus. Tiểu đơn vị p66 chứa cả vùng DNA polymerase và RNase H. Nghiên cứu đã thành công trong việc phân lập, tách dòng và biểu hiện gen mã hóa cho tiểu đơn vị p66. Điều kiện tối ưu cho việc biểu hiện dư thừa p66 trong E. coli đã được xác định, bao gồm nồng độ IPTG 1 mM và nhiệt độ cảm ứng 30°C trong 5 giờ. Protein tái tổ hợp thu được ở dạng tan, tạo thuận lợi cho quá trình tinh sạch và bảo toàn hoạt tính enzyme.

Mục lục chi tiết:

  • TÓM TẮT
  • MỞ ĐẦU
  • NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
    • Nguyên liệu
    • Thiết kế mồi
    • Thiết kế vector biểu hiện và biểu hiện tiểu đơn vị p66 trong E. coli
  • Phân tích Western blot
  • KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
    • Tách dòng, phân tích trình tự nucleotide và amino acid gen mã hóa tiểu đơn vị p66 của enzyme phiên mã ngược ở virus HIV-1
      • Tách dòng gen mã hóa tiểu đơn vị HIV-1 RT p66
      • Phân tích trình tự nucleotide và amino acid của tiểu đơn vị p66
    • Biểu hiện gen mã hóa tiểu đơn vị p66 của enzyme phiên mã ngược ở virus HIV-1 trong E. coli
      • Thiết kế vector biểu hiện
      • Biểu hiện HIV-1 RT p66 trong chủng Rosetta gami™
      • Tối ưu điều kiện biểu hiện
    • Khảo sát tính tan của tiểu đơn vị HIV-1 RT p66
  • KẾT LUẬN
  • TÀI LIỆU THAM KHẢO
  • CLONING AND EXPRESSION OF GENE ENCODING SUBUNIT P66 OF HIV-1 REVERSE TRANSCRIPTASE