Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 7 trang
Dung lượng: 169 KB

Giới thiệu nội dung

ATPase activity of magnesium chelatase subunit I is required to maintain subunit D in vivo

Tác giả: Vanessa Lake, Ulf Olsson, Robert D. Willows, and Mats Hansson

Lĩnh vực: Sinh hóa học, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào vai trò của tiểu đơn vị I (40 kDa) của enzyme magnesium chelatase trong quá trình sinh tổng hợp chlorophyll. Enzyme này bao gồm ba tiểu đơn vị với khối lượng phân tử xấp xỉ 40, 70 và 140 kDa. Các đột biến ở tiểu đơn vị 40 kDa của lúa mạch cho thấy nó thiết yếu cho sự tồn tại của tiểu đơn vị 70 kDa. Tiểu đơn vị 40 kDa thuộc họ protein ‘ATPases associated with various cellular activities’ (AAA+), có chức năng như các chaperone phân tử. Nghiên cứu đã phân tích ảnh hưởng của các đột biến trên protein 40 kDa của lúa mạch và Rhodobacter capsulatus. Kết quả cho thấy hoạt động ATPase của tiểu đơn vị 40 kDa là cần thiết cho chức năng chaperone của nó, và sự liên kết đơn thuần giữa tiểu đơn vị 40 và 70 kDa là không đủ để duy trì tiểu đơn vị 70 kDa trong tế bào. Các protein 40 kDa thiếu hoạt động ATPase không thể tham gia vào bước xúc tác sau khi liên kết với tiểu đơn vị 70 kDa, một bước được cho là liên quan đến sự thay đổi cấu trúc của phức hợp do thủy phân ATP.

Mục lục chi tiết:

  • ATPase activity of magnesium chelatase subunit I is required to maintain subunit D in vivo
  • Keywords: AAA; barley; chlorophyll; magnesium chelatase; Rhodobacter capsulatus.
  • The first unique enzymatic reaction of the (bacterio)chlorophyll biosynthetic pathway is the insertion of Mg2+ into protoporphyrin IX.
  • The three-dimensional structure of the Rhodobacter capsulatus BchI has recently been determined and it was found to belong to the large family of ‘ATPases associated with various cellular activities’, or AAA+ proteins [10].
  • Materials and methods
  • Biological material
  • Recombinant R. capsulatus BchI and BchD magnesium chelatase subunits were used in the study.
  • Ni-affinity chromatography
  • SDS/PAGE and Western blot analysis
  • Magnesium chelatase antisera
  • mRNA analysis
  • Results
  • Presence of magnesium chelatase subunits in barley xantha-h mutants
  • Binding of mutated Bchl to BchD
  • Presence of Xantha-g mRNA in xantha-h mutants
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • References