Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 16 trang
Dung lượng: 297 KB

Giới thiệu nội dung

The thermostable T. elongatus Dps: An intrinsically stable cage-like structure endowed with enhanced stability

Tác giả: Stefano Franceschini, Pierpaolo Ceci, Flaminia Alaleona, Emilia Chiancone, Andrea Ilari

Lĩnh vực: Sinh học Phân tử, Cấu trúc Protein, Vi sinh vật học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc mô tả cấu trúc và đặc tính của protein Dps từ vi khuẩn lam ưa nhiệt Thermosynechococcus elongatus (Dps-Te). Protein này sở hữu một cấu trúc lồng (cage-like) ổn định, được cấu thành từ 12 đơn vị giống nhau, thể hiện khả năng chống chịu nhiệt độ cao và các điều kiện pH khắc nghiệt. Dps-Te có vai trò quan trọng trong việc bảo vệ tế bào khỏi tổn thương oxy hóa, đặc biệt là DNA, thông qua khả năng oxy hóa sắt (II) với hydro peroxide, ngăn chặn sự hình thành gốc hydroxyl độc hại. Nghiên cứu cũng phân tích chi tiết các tương tác phân tử, cấu trúc các lỗ hổng (pores) và trung tâm ferroxidase, làm rõ cơ chế đóng góp vào tính ổn định nhiệt và chức năng bảo vệ của protein này.

Mục lục chi tiết:

  • Introduction
  • Keywords
  • Correspondence
  • Database
  • Abbreviations
  • The thermostable T. elongatus Dps
  • Results
    • Sequence analysis
    • Monomer fold and dodecameric assembly
    • Trimeric ‘ferritin-like’ interface
    • Trimeric ‘Dps-like’ interface
    • Dimeric interface and ferroxidase centre
    • The ‘ferritin-like’ and ‘Dps-like’ pores
  • State of association as a function of pH and temperature
  • Iron incorporation kinetics
  • CD spectroscopy
  • HPLC and gel-filtration experiments
  • DNA-binding ability and DNA protection against hydroxyl radicals
  • Discussion
  • Experimental procedures
    • Construction of the Dps-Te gene
    • Strains and media
    • Expression and purification of Dps-Te
    • Protein crystallization
    • Data collection and processing
    • Structure solution and refinement
    • DNA-binding and protection assays
    • Iron incorporation kinetics
    • CD spectroscopy
    • HPLC and gel-filtration experiments
  • Acknowledgements
  • References