A Zinc Finger HIT Domain-Containing Protein, ZNHIT-1, Interacts with Orphan Nuclear Hormone Receptor Rev-erbß and Removes Rev-erbß-Induced Inhibition of ApoCIII Transcription

A zinc finger HIT domain-containing protein, ZNHIT-1, interacts with orphan nuclear hormone receptor Rev-erbß and removes Rev-erbß-induced inhibition of apoCIII transcription

A zinc finger HIT domain-containing protein, ZNHIT-1, interacts with orphan nuclear hormone receptor Rev-erbß and removes Rev-erbß-induced inhibition of apoCIII transcription

Tác giả: Jiadong Wang, Yang Li, Min Zhang, Zhongle Liu, Cong Wu, Hanying Yuan, Yu-Yang Li, Xin Zhao and Hong Lu

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Hóa sinh

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào vai trò của protein ZNHIT-1, một protein chứa domain kẽm HIT, trong việc tương tác với thụ thể hormone hạt nhân mồ côi Rev-erbß và ảnh hưởng đến quá trình phiên mã gen apoCIII. Các thụ thể mồ côi Rev-erba và Rev-erbß, là thành viên của siêu họ thụ thể hạt nhân, đóng vai trò trong việc ức chế biểu hiện gen apolipoprotein CIII (apoCIII). Nghiên cứu đã chứng minh rằng ZNHIT-1 tương tác trực tiếp với Rev-erbß. Protein ZNHIT-1 được xác định là một protein hạt nhân và có một tín hiệu định vị hạt nhân (NLS) ở các axit amin 38-47. Sự tương tác giữa ZNHIT-1 và Rev-erbß đòi hỏi domain gắn kết ligand của Rev-erbß và motif FxxLL của ZNHIT-1. Quan trọng hơn, ZNHIT-1 được Rev-erbß tuyển mộ đến vùng promoter của gen apoCIII và loại bỏ sự ức chế phiên mã apoCIII do Rev-erbß gây ra. Những phát hiện này cho thấy ZNHIT-1 hoạt động như một yếu tố đồng điều hòa, đóng vai trò trong việc điều chỉnh hoạt động của Rev-erbß và có thể tham gia vào quá trình chuyển hóa lipid.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Kết quả
• Sàng lọc hai chuỗi lai nấm men
• Phân tích các protein đồng đẳng và phân bố mô của ZNHIT-1 ở người
• Phân tích định vị dưới tế bào của ZNHIT-1
• Đặc trưng hóa sự tương tác giữa ZNHIT-1 và Rev-erbß
• Xác định vùng tương tác giữa ZNHIT-1 và Rev-erbß
• Sự đồng định vị của ZNHIT-1 và Rev-erbß trong nhân
• Sự tuyển mộ ZNHIT-1 bởi Rev-erbß đến promoter apoCIII và ảnh hưởng của nó lên promoter apoCIII
• Không có sự thay đổi trong hoạt động gắn kết DNA của Rev-erbß với promoter apoCIII bởi ZNHIT-1
• Thảo luận
• Thủ tục thực nghiệm
• Xây dựng plasmid và biểu hiện protein
• Sàng lọc hai chuỗi lai nấm men
• Thử nghiệm kéo bằng GST
• Thử nghiệm Co-IP
• Phân tích định vị dưới tế bào
• Thử nghiệm gen báo cáo luciferase
• Thử nghiệm ChIP
• Kiểm soát ổn định sự suy giảm ZNHIT-1
• Lời cảm ơn
• Tài liệu tham khảo