Crystal Structures of the Regulatory Subunit of Thr-Sensitive Aspartate Kinase from Thermus Thermophilus

Crystal structures of the regulatory subunit of Thr-sensitive aspartate kinase from Thermus thermophilus

Tên đề tài: Crystal structures of the regulatory subunit of Thr-sensitive aspartate kinase from Thermus thermophilus

Tác giả: Ayako Yoshida, Takeo Tomita, Hidetoshi Kono, Shinya Fushinobu, Tomohisa Kuzuyama, Makoto Nishiyama

Lĩnh vực: Enzyme structure and crystallization

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này trình bày cấu trúc tinh thể của tiểu đơn vị điều hòa của enzyme kinase aspartate nhạy cảm với threonin (TtAKβ) từ vi khuẩn ưa nhiệt Thermus thermophilus. Các cấu trúc đã được xác định ở dạng liên kết với threonin (TtAKβ-Thr) với độ phân giải 2.15 Å và dạng không có threonin (TtAKβ-free) với độ phân giải 2.98 Å. Cả hai dạng đều kết tinh dưới dạng dimer, tuy nhiên, diện tích bề mặt tiếp xúc giữa các dimer của TtAKβ-free nhỏ hơn TtAKβ-Thr, cho thấy threonin thúc đẩy sự hình thành dimer. Nghiên cứu cũng làm sáng tỏ cơ chế điều hòa của threonin và các yếu tố góp phần vào độ bền nhiệt cao của TtAKβ. So sánh với các enzyme kinase aspartate khác cho thấy các đặc điểm cấu trúc độc đáo của TtAKβ, đặc biệt là cách tổ chức các miền ACT và vai trò của chúng trong việc liên kết chất ức chế và duy trì độ bền nhiệt.

Mục lục chi tiết:

• Keywords
• Correspondence
• Results and Discussion
• Model quality
• Overall structure
• Thr-binding site
• Monomer-dimer equilibrium
• Conformational change of TtAKẞ upon Thr binding and its implications
• Comparison with other AKs
• Potential factors involved in the high thermostability of TtAKẞ
• Experimental procedures
• Enzyme production and crystallization
• Data collection
• Structure determination and refinement
• Determination of quaternary structure
• DSC measurement
• Calculations of solvent-accessible surface area and cavity volumes of proteins
• Acknowledgements
• References