A Novel Antifungal Hevein-Type Peptide From Triticum Kiharae Seeds With A Unique 10-Cysteine Motif

A Novel Antifungal Hevein-Type Peptide from Triticum Kiharae Seeds with a Unique 10-Cysteine Motif

Tác giả: Tatyana I. Odintsova, Alexander A. Vassilevski, Anna A. Slavokhotova, Alexander K. Musolyamov, Ekaterina I. Finkina, Natalia V. Khadeeva, Eugene A. Rogozhin, Tatyana V. Korostyleva, Vitalii A. Pukhalsky, Eugene V. Grishin, Tsezi A. Egorov

Lĩnh vực: Triticum kiharae seeds, Antimicrobial peptide, Chitin-binding, Cysteine motif, Recombinant peptide

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này mô tả việc phân lập, giải trình tự và đặc tính hóa hai peptide kháng khuẩn mới có độ tương đồng cao, được đặt tên là WAMP-1a và WAMP-1b, từ hạt lúa mì Triticum kiharae. Các peptide này, với cấu trúc 44 và 45 axit amin, thuộc về một loại peptide kháng khuẩn thực vật (AMP) kiểu hevein mới, đặc trưng bởi motif 10 cysteine độc đáo. Mặc dù chia sẻ sự tương đồng về trình tự với các protein liên quan đến hevein và các domain gắn kết chitin của chitinase loại I ở ngũ cốc, WAMPs có một cấu trúc motif cysteine khác biệt. Một điểm đặc biệt khác là sự thay thế glycine cho serine trong vùng gắn kết chitin. Nghiên cứu đã chứng minh rằng peptide WAMP-1a tái tổ hợp, được sản xuất hiệu quả trong E. coli, thể hiện hoạt tính kháng nấm phổ rộng mạnh mẽ đối với cả các mầm bệnh chứa chitin và không chứa chitin. Khả năng kháng mầm bệnh không chứa chitin cho thấy sự tồn tại của các cơ chế tác động khác nhau, làm sáng tỏ sự phức tạp của tương tác thực vật-vi sinh vật.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Results
• Isolation and sequencing of WAMPS
• Recombinant peptide production
• Antimicrobial activity of the recombinant WAMP-1a
• Experimental procedures
• Biological material and chemicals
• Isolation of WAMPS
• Reduction and alkylation of peptides
• Analytical methods
• Expression vector construction
• Fusion protein production and purification
• Fusion protein cleavage and target peptide isolation
• Antifungal assays
• Antibacterial assays
• Acknowledgements
• References