Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: Đang cập nhật

Giới thiệu nội dung

Chinese Hamster Apurinic/Apyrimidinic Endonuclease (chAPE1) Expressed in sf9 Cells Reveals That Its Endonuclease Activity Is Regulated by Phosphorylation

Tác giả: Mandula Borjigin, Bobbie Martinez, Sarla Purohit, Gaudalupe de la Rosa, Pablo Arenaz, Boguslaw Stec

Lĩnh vực: Hóa sinh, Sinh học phân tử

Nội dung tài liệu:

Nghiên cứu này tập trung vào việc khảo sát hoạt tính của enzyme apurinic/apyrimidinic endonuclease (APE) từ chuột đồng Trung Quốc (chAPE1) được biểu hiện trong tế bào côn trùng sf9. Enzyme APE đóng vai trò thiết yếu trong con đường sửa chữa vết cắt bazơ, khởi tạo bằng cách tạo một vết cắt 5′ trước vị trí abasic trong DNA chuỗi đôi. Mặc dù các tế bào buồng trứng chuột đồng Trung Quốc là mô hình quan trọng cho nghiên cứu sửa chữa DNA, enzyme chAPE1 chưa được nghiên cứu đầy đủ trong ống nghiệm về đặc tính động học. Nghiên cứu này báo cáo kết quả khảo sát động học của enzyme chAPE1 đã được nhân bản và biểu hiện quá mức trong tế bào sf9. Các thông số động học thu được tương thích với phạm vi rộng các thông số động học đã báo cáo cho enzyme ở người. Tuy nhiên, hoạt tính đo được lại phụ thuộc vào thời điểm thu hoạch tế bào nuôi cấy. Các nhà nghiên cứu đã áp dụng phương pháp quang phổ phát xạ plasma ghép cảm ứng (ICP) để đo mức độ phosphoryl hóa của chAPE1. Dữ liệu cho thấy mức độ phosphoryl hóa cao hơn của chAPE1 trong tế bào biểu hiện tương quan với hoạt tính endonuclease thấp hơn. Sự phosphoryl hóa của chAPE1 với hoạt tính cao hơn bởi casein kinase II đã làm giảm hoạt tính endonuclease, trong khi quá trình dephosphorylation bởi lambda phosphatase lại làm tăng hoạt tính endonuclease. Hoạt tính exonuclease của chAPE1 không được quan sát thấy trong phân tích động học. Kết quả cho thấy sự khác biệt đáng chú ý trong các mức độ hoạt tính được báo cáo cho enzyme APE1 ở người có thể là do phosphoryl hóa chưa được tính đến. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng chỉ một số kinase và phosphatase chọn lọc mới có ảnh hưởng điều hòa đến hoạt tính endonuclease của chAPE1, gợi ý thêm rằng cơ chế điều hòa này có thể hoạt động trong cơ thể sống để bật/tắt chức năng của enzyme quan trọng này ở các sinh vật khác nhau.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Kết quả
  • Thảo luận
  • Tài liệu tham khảo
  • Thư cảm ơn