Nghiên cứu phân lập và khảo sát hoạt tính kháng sinh, gây độc tế bào của các hợp chất thứ cấp từ ba chủng xạ khuẩn Streptomyces G246, G261, G248 thu thập tại vùng biển miền Trung – Việt Nam

Nghiên cứu Phân Lập và Khảo Sát Hoạt Tính Kháng Sinh, Gây Độc Tế Bào Của Các Hợp Chất Thứ Cấp Từ Ba Chủng Xạ Khuẩn Streptomyces G246, G261, G248 Thu Thập Tại Vùng Biển Miền Trung – Việt Nam

Tác giả: Cao Đức Danh

Lĩnh vực: Hóa học

Nội dung tài liệu:

Công trình này tập trung nghiên cứu về các hợp chất thứ cấp có hoạt tính sinh học được phân lập từ các chủng xạ khuẩn Streptomyces thu thập từ vùng biển miền Trung Việt Nam. Mục tiêu chính là phân lập, xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất này, đồng thời khảo sát hoạt tính kháng sinh, kháng lao và gây độc tế bào ung thư của chúng. Nghiên cứu đã thành công trong việc phân lập và xác định cấu trúc của 10 hợp chất từ chủng Streptomyces sp. G246, trong đó có 2 hợp chất mới là G246-1 và G246-2, được xác định là (2S,2″S)-6-lavandulyl-7-methoxy-5,2′,4′-trihydroxylflavanone và (2″S)-5′-lavandulyl-4′-methoxy-2,4,2′,6′-tetrahydroxylchalcone. Các hợp chất phân lập được đã được thử nghiệm về hoạt tính kháng vi sinh vật, kháng lao và gây độc tế bào trên các dòng tế bào ung thư người. Kết quả cho thấy nhiều hợp chất có hoạt tính kháng vi sinh vật mạnh, một số có hoạt tính kháng lao đáng chú ý, và nhiều hợp chất thể hiện khả năng gây độc tế bào ung thư.

Mục lục chi tiết:

CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN

• 1.1. Sự phân bố và tính đa dạng của vi sinh vật biển
• 1.2. Xạ khuẩn và sự hình thành các hợp chất thứ cấp từ xạ khuẩn
• 1.3. Các họ xạ khuẩn biển thường gặp
• 1.4. Các hợp chất thứ cấp có hoạt tính sinh học từ xạ khuẩn biển
• 1.4.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới
• 1.4.1.1. Các hợp chất có hoạt tính kháng sinh
• 1.4.1.2. Các hợp chất có hoạt tính kháng lao
• 1.4.1.3. Các hợp chất có hoạt tính gây độc tế bào
• 1.4.2. Tình hình nghiên cứu trong nước

CHƯƠNG 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

• 2.1. Vật liệu và thiết bị nghiên cứu
• 2.1.1. Vật liệu
• 2.1.3. Thiết bị
• 2.2. Phương pháp nghiên cứu
• 2.2.1. Phương pháp thu thập mẫu
• 2.2.2. Phương pháp phân lập xạ khuẩn biển
• 2.2.3. Phương pháp làm sạch các chủng bằng que cấy vòng
• 2.2.4. Phương pháp giữ giống xạ khuẩn sau phân lập
• 2.2.5. Phương pháp hoạt hoá và nuôi cấy
• 2.2.6. Phương pháp tạo cặn chiết từ dịch nuôi cấy để sàng lọc hoạt tính sinh học
• 2.2.7. Phương pháp định danh xạ khuẩn
• 2.2.8. Phương pháp sinh khối lượng lớn
• 2.2.9. Phương pháp phân lập các hợp chất thứ cấp.
• 2.2.10. Phương pháp xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất sạch tách chiết được
• 2.2.11. Phương pháp thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định
• 2.2.12. Phương pháp thử hoạt tính gây độc tế bào
• 2.2.13. Phương pháp thử hoạt tính kháng lao.

CHƯƠNG 3. THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ

• 3.1. Kết quả thu mẫu
• 3.2. Kết quả phân lập các chủng xạ khuẩn
• 3.3. Kết quả thử hoạt tính sinh học của các chủng thu được.
• 3.4. Kết quả định danh các chủng xạ khuẩn có hoạt tính sinh học
• 3.4.1. Quan sát đặc điểm hình thái các chủng nghiên cứu
• 3.4.2. Nhân gen 16S ARN riboxom
• 3.4.3. Giải trình tự gen
• 3.5. Kết quả sinh khối lượng lớn các chủng có hoạt tính sinh học tốt.
• 3.6. Tách chiết và xác định cấu trúc hóa học các hợp chất phân lập được từ chủng xạ khuẩn Streptomyces sp. G246
• 3.6.1. Xử lý mẫu, tạo cặn chiết
• 3.6.2. Phân lập các hợp chất từ các cặn chiết
• 3.6.3. Thông số vật lí và dữ liệu phổ của các hợp chất phân lập được từ chủng Streptomyces sp. G246
• 3.7. Tách chiết và xác định cấu trúc hóa học các hợp chất thứ cấp từ các chủng xạ khuẩn Streptomyces sp. G261
• 3.7.1. Xử lý mẫu, tạo cặn chiết
• 3.7.2. Phân lập được từ chủng Streptomyces sp. G261
• 3.7.3 Thông số vật lý và dữ liệu phổ của các hợp chất thứ cấp từ chủng xạ khuẩn Streptomyces sp. G261
• 3.8. Tách chiết và xác định cấu trúc hóa học các hợp chất thứ cấp từ các chủng xạ khuẩn Streptomyces sp. G248
• 3.8.1. Xử lý mẫu, tạo cặn chiết
• 3.8.2. Phân lập các hợp chất từ các cặn chiết
• 3.8.3. Thông số vật lý và dữ liệu phổ của các hợp chất phân lập được từ chủng xạ khuẩn Streptomyces sp. G248
• 3.9. Kết quả thử hoạt tính sinh học của các hợp chất phân lập được từ các chủng xạ khuẩn
• 3.9.1. Kết quả thử hoạt tính đối với VSVKĐ của một số hợp chất phân lập được
• 3.9.2. Kết quả thử hoạt tính kháng lao của một số hợp chất phân lập được
• 3.9.3. Kết quả thử hoạt tính gây độc tế bào của một số hợp chất phân lập được

CHƯƠNG 4. THẢO LUẬN KẾT QUẢ

• 4.1. Kết quả thu mẫu
• 4.2. Kết quả phân lập các chủng xạ khuẩn
• 4.3. Kết quả thử hoạt tính sinh học của các chủng thu được.
• 4.4. Kết quả định danh các chủng xạ khuẩn có hoạt tính sinh học
• 4.4.1. Quan sát đặc điểm hình thái các chủng nghiên cứu
• 4.4.2. Nhân gen 16S ARN riboxom
• 4.4.3. Giải trình tự gen xác định tên các chủng xạ khuẩn
• 4.5. Kết quả sinh khối lượng lớn các chủng có hoạt tính sinh học tốt.
• 4.6. Xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất phân lập được từ chủng xạ khuẩn Streptomyces sp. G246