Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 128 trang
Dung lượng: 2 MB

Giới thiệu nội dung

Đánh giá hiệu quả chống lão hóa da của Astaxanthin chiết xuất từ tảo Haematococcus pluvialis trên mô hình chuột

Tác giả: Tô Minh Quân

Lĩnh vực: Công nghệ Sinh học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung đánh giá khả năng chống lão hóa da của Astaxanthin (AST) chiết xuất từ tảo Haematococcus pluvialis (AST-EX). AST, một chất chống oxy hóa mạnh, được chiết xuất từ nguồn tảo H. pluvialis và thử nghiệm trên mô hình tế bào nguyên bào sợi (hF) chống lại tác hại của hydrogen peroxide (H2O2) và trên da chuột chống lại tác hại của tia cực tím (UVB). Kết quả cho thấy AST-EX có khả năng bảo vệ tế bào và da chuột khỏi các tác nhân gây lão hóa, duy trì sự tăng sinh của tế bào, giảm các dấu hiệu lão hóa như nếp nhăn và độ dày biểu bì.

Mục lục chi tiết:

  • MỞ ĐẦU
  • CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
    • 1.1. Tổng quan về vi tảo Haematococcus pluvialis
      • 1.1.1. Đặc điểm hình thái
    • 1.2. Giới thiệu về astaxanthin
    • 1.3. Nguồn thu nhận AST
      • 1.3.1. Quá trình hình thành astxanthin ở Haematococcus pluvialis
      • 1.3.2. Điều kiện nuôi cấy và cảm ứng AST ở Haematococcus pluvialis
    • 1.4. Cơ chế chống lão hóa của AST
      • 1.4.1. Hoạt tính chống oxy hóa
      • 1.4.2. Hoạt tính kháng viêm
      • 1.4.3. Hoạt tính tăng cường miễn dịch
      • 1.4.4. Hoạt tính điều hòa sửa chữa tổn thương tế bào và DNA
    • 1.5. Cấu trúc da
    • 1.6. Lão hóa da
    • 1.7. Lão hóa tế bào
    • 1.8. Lão hóa do ROS
      • 1.8.1. Chức năng của ROS
      • 1.8.2. ROS trong lão hóa và các bệnh liên quan đến tuổi tác
  • CHƯƠNG 2. VẬT LIỆU – PHƯƠNG PHÁP
    • 2.1. Phương pháp nghiên cứu
    • 2.2. Đối tượng nghiên cứu
    • 2.3. Hóa chất
      • 2.3.1. Môi trường nuôi tảo
      • 2.3.2. Hóa chất nuôi tế bào
    • 2.4. Sơ đồ thí nghiệm tổng quát
    • 2.5. Phương pháp nghiên cứu
      • 2.5.1. Thiết kế hệ thống nuôi tảo
      • 2.5.2. Phương pháp nuôi tảo trong chai nuôi 1000 ml
      • 2.5.3. Phương pháp cảm ứng tảo HP-C tổng hợp AST bằng cường độ ánh sáng mạnh
      • 2.5.4. Phương pháp thu nhận dịch chiết AST
      • 2.5.5. Phương pháp định lượng AST
      • 2.5.6. Phương pháp thu nhận dịch chiết tảo Haematococcus pluvialis giàu AST (AST-EX)
      • 2.5.7. Phương pháp FRAP
      • 2.5.8. Phương pháp ABTS
      • 2.5.9. Phương pháp đánh giá độc tính của AST-EX trên nguyên bào sợi
      • 2.5.10. Phương pháp đánh giá sự tăng sinh của nguyên bào sợi trong môi trường AST-EX
      • 2.5.11. Phương pháp đánh giá sự di cư tế bào theo phương pháp Scratch-wound assay
      • 2.5.12. Phương pháp MTT để đánh giá sức sống tế bào
      • 2.5.13. Phương pháp tạo mô hình lão hóa bằng hydrogen peroxide (H2O2)
      • 2.5.14. Phương pháp nhuộm senescence -associated ẞ-galactosidase
      • 2.5.15. Phương pháp đánh giá khả năng của AST-EX trong việc bảo vệ tế bào trước yếu tố gây lão hóa H2O2
      • 2.5.16. Phương pháp nhuộm Hoestch và phalloidin để đánh giá hình dạng tế bào
      • 2.5.17. Phương pháp đánh giá sự biểu hiện mRNA tế bào bằng phương pháp realtime PCR
      • 2.5.18. Phương pháp WESTERN BLOT đánh giá sự biểu hiện CDK4, CDK6 và cyclin D1
      • 2.5.19. Phương pháp tạo mô hình chuột lão hóa da
      • 2.5.20. Phương pháp đánh giá khả năng bảo vệ da chuột khỏi tia UVB
  • CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ – BIỆN LUẬN
    • 3.1. Nuôi cấy tăng sinh HP-C và cảm ứng AST
    • 3.2. Tách chiết AST
    • 3.3. Chống oxi hóa FRAP
    • 3.4. Chống oxi hóa ABTS
    • 3.5. Độc tính in vitro
    • 3.6. Tăng sinh
    • 3.7. Di cư
    • 3.8. Khảo sát quy trình gây lão hóa tế bào bằng H2O2
      • 3.8.1. Kết quả khảo sát sự tăng trưởng tế bào
      • 3.8.2. Kết quả khảo sát sự biểu hiện SA-gal
    • 3.9. Khảo sát khả năng bảo vệ tế bào nguyên bào sợi của AST-EX khỏi tác động của H2O2
      • 3.9.1. Kết quả đánh giá diện tích tế bào
      • 3.9.2. Kết quả đánh giá sự tăng sinh tế bào
      • 3.9.3. Kết quả đánh giá sự biểu hiện SA-gal
      • 3.9.4. Kết quả đánh giá sự biểu hiện marker lão hóa p53, p21, p16 bằng phương pháp realtime PCR
      • 3.9.5. Kết quả đánh giá sự biểu hiện MMP3, MMP1, collagen, elastin
      • 3.9.6. Kết quả đánh giá sự biểu hiện CDK4, CDK6, cyclin D1
    • 3.10. Kết quả đánh giá khả năng bảo vệ da chuột lão hóa do tia UV
      • 3.10.1. Mô hình lão hóa da do tia UV
      • 3.10.2. Kết quả khả năng bảo vệ da của AST-EX khỏi tác hại tia UV
  • CHƯƠNG 4. KẾT LUẬN- KIẾN NGHỊ
  • DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO