Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Sử dụng kỹ thuật FISH để kiểm tra sự hội nhập của gen IL-6 phân lập từ người trong tế bào gốc phôi gà chuyển gen

Sử dụng Kỹ thuật FISH để Kiểm tra Sự Hội nhập của Gen IL-6 Phân lập từ Người trong Tế bào Gốc Phôi Gà Chuyển Gen

Tác giả: Nguyễn Tiến Lung

Lĩnh vực: Sinh học Thực nghiệm

Nội dung tài liệu: Luận văn Thạc sĩ Khoa học này tập trung vào việc ứng dụng kỹ thuật Fluorescence in situ hybridization (FISH) để kiểm tra sự hội nhập của gen Interleukin-6 (IL-6) phân lập từ người vào trong tế bào gốc phôi gà đã được chuyển gen. Nghiên cứu nhằm đánh giá tiềm năng của vector chuyển gen lentivirus trong việc tích hợp gen vào tế bào gốc phôi gà, từ đó tạo cơ sở cho việc tạo gà chuyển gen thông qua tế bào gốc. Đồng thời, công trình này cũng góp phần phát triển kỹ thuật FISH trong nghiên cứu cơ bản tại Việt Nam.

Mục lục chi tiết:

• MỞ ĐẦU
• Chương 1 – TỔNG QUAN
  • 1.1. CHUYỂN GEN Ở GÀ
    • 1.1.1. Các phương thức chuyển gen vào tế bào
      • 1.1.1.1. Chuyển gen sử dụng vector virus
      • 1.1.1.2. Chuyển gen không dùng virus
    • 1.1.2. Các phương pháp tạo gà chuyển gen
      • 1.1.2.1. Vi tiêm trực tiếp ADN vào đĩa phôi giai đoạn sớm
      • 1.1.2.2. Chuyển gen qua tinh trùng
      • 1.1.2.3. Chuyển gen thông qua trung gian tế bào
    • 1.1.3. Những ứng dụng của gà chuyển gen
      • 1.1.3.1. Tạo mô hình nghiên cứu y – sinh học
      • 1.1.3.2. Sản xuất protein tái tổ hợp
  • 1.2. KỸ THUẬT LẠI HUỲNH QUANG TẠI CHỖ (FISH)
    • 1.2.1. Nguyên lý
    • 1.2.2. Đầu dò cho phản ứng lai
    • 1.2.3. Ưu điểm của kỹ thuật FISH
    • 1.2.4. Ứng dụng của kỹ thuật FISH
  • 1.3. INTERLEUKIN 6 Ở NGƯỜI
    • 1.3.1. Giới thiệu
    • 1.3.2. Chức năng
    • 1.3.3. Những ứng dụng lâm sàng
    • 1.3.4. Gen mã hóa IL–6 ở người
• Chương 2 – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
  • 2.1. ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ HÓA CHẤT
    • 2.1.1. Đối tượng – vật liệu nghiên cứu
    • 2.1.2. Dụng cụ và vật tư tiêu hao
    • 2.1.3. Thiết bị nghiên cứu
    • 2.1.4. Hoá chất sử dụng
  • 2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
    • 2.2.1. Tổng hợp đầu dò gắn huỳnh quang cho phản ứng lai FISH
    • 2.2.2. Thu nhận tế bào gốc phôi gà chuyển gen IL-6 người
    • 2.2.3. Phương pháp lai huỳnh quang tại chỗ (FISH)
• Chương 3 – KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
  • 3.1. TỔNG HỢP ĐẦU DÒ HUỲNH QUANG BẰNG PHƯƠNG PHÁP PCR
    • 3.1.1. Thiết kế cặp mồi nhân đoạn gen IL – 6
    • 3.1.2. Tối ưu hóa điều kiện phản ứng PCR
    • 3.1.3. Kết quả tổng hợp đầu dò bằng phản ứng PCR
  • 3.2. THU NHẬN TẾ BÀO GỐC PHÔI GÀ CHUYỂN GEN IL–6 NGƯỜI
    • 3.2.1. Phân lập và nhân nuôi tế bào gốc phôi gà
    • 3.2.2. Thu nhận và duy trì tế bào gốc phôi gà chuyển gen
    • 3.2.3. Kiểm tra sự có mặt gen chuyển trong tế bào bằng phản ứng PCR
  • 3.3. KẾT QUẢ LẠI FISH PHÁT HIỆN GEN IL–6 TRONG CESCs
  • 3.4. THẢO LUẬN
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC