Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 221 KB

Giới thiệu nội dung

Propionate CoA-transferase from Clostridium propionicum: Cloning of the gene and identification of glutamate 324 at the active site

Tác giả: Thorsten Selmer, Angela Willanzheimer and Marc Hetzel

Lĩnh vực: Sinh hóa học phân tử, Vi sinh vật học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này báo cáo việc tinh sạch enzyme propionate CoA-transferase từ Clostridium propionicum, giải trình tự gen mã hóa enzyme này và xác định vị trí của glutamate 324 tại trung tâm hoạt động. Enzyme này bị bất hoạt nhanh chóng và không thể phục hồi bởi sodium borohydride hoặc hydroxylamine khi có mặt propionyl-CoA. Việc giảm este thiol giữa một glutamate tại vị trí xúc tác và CoA bằng borohydride, cùng với sự phân cắt bởi hydroxylamine, đã được sử dụng để đưa một nhãn đặc hiệu vị trí. Phân tích bằng MALDI-TOF-MS đã cho phép xác định glutamate 324 ở vị trí hoạt động. Enzyme này và các protein tương tự được suy ra từ bộ gen của Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus halodurans và Aeropyrum pernix được đề xuất là tạo thành một lớp phụ mới của các enzyme CoA-transferase. Các dự đoán cấu trúc thứ cấp đã được tạo ra và so sánh với các cấu trúc tinh thể đã biết trong cơ sở dữ liệu, cho thấy sự tương đồng cấu trúc cao giữa các yếu tố cấu trúc thứ cấp trong các protein này và glutaconate CoA-transferase từ Acidaminococcus fermentans.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Tài liệu và phương pháp
  • Kết quả
  • Thảo luận
  • Tài liệu tham khảo