Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 9 trang
Dung lượng: 187 KB

Giới thiệu nội dung

Maturation of Pichia pastoris-derived recombinant pro-Der p 1 induced by deglycosylation and by the natural cysteine protease Der p 1 from house dust mite

Tác giả: Erica van Oort, Pleuni G. de Heer, W. Astrid van Leeuwen, Ninotska I. L. Derksen, Marcel Müller, Stephan Huveneers, Rob C. Aalberse and Ronald van Ree

Lĩnh vực: Miễn dịch học, Dị ứng học, Công nghệ sinh học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc biểu hiện protein pro-Der p 1 tái tổ hợp trong nấm men Pichia pastoris và khám phá các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình trưởng thành của nó. Protein pro-Der p 1 tái tổ hợp được biểu hiện ở mức độ cao và cho thấy đặc tính dị ứng thấp hơn so với protein tự nhiên. Quá trình trưởng thành của protein tái tổ hợp có thể được thúc đẩy bằng cách loại bỏ các nhóm N-glycan hoặc bằng sự hiện diện của enzyme protease tự nhiên Der p 1. Phát hiện này mở ra tiềm năng ứng dụng protein pro-Der p 1 tái tổ hợp trong liệu pháp miễn dịch dị ứng.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
  • Biểu hiện trong P. pastoris
  • Tinh sạch các dị nguyên (tái tổ hợp)
  • Phân tích trình tự của pro-Der p 1 và Der p 1 trưởng thành
  • Biểu hiện pro-Der p 1 trong P. pastoris chủng SMD1168h
  • Phân tích SDS/PAGE và immunoblotting
  • Phân tích CD
  • Độ nhạy cảm với IgE (thử nghiệm RAST và giải phóng histamine)
  • Các thử nghiệm dị nguyên chính (RIA cạnh tranh, ELISA sandwich)
  • Biểu hiện pro-Der p 1 trong chủng Pichia GS115 và X-33
  • Xử lý tự động của pro-Der p 1
  • Phân cắt do protease của pro-Der p 1 tái tổ hợp
  • Thảo luận