Báo cáo Y học: Crystal structure of the catalytic domain of a human thioredoxin-like protein

Crystal structure of the catalytic domain of a human thioredoxin-like protein

Tác giả: Jian Jin, Xuehui Chen, Yan Zhou, Mark Bartlam, Qing Guo, Yiwei Liu, Yixin Sun, Yu Gao, Sheng Ye, Guangtao Li, Zihe Rao, Boqin Qiang và Jiangang Yuan

Lĩnh vực: Sinh hóa, Cấu trúc protein

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này trình bày việc xác định cấu trúc tinh thể của miền xúc tác N-terminal của protein giống thioredoxin ở người (hTRXL-N) ở dạng oxy hóa với độ phân giải 2.2-Å. Mặc dù miền này có cấu trúc ba chiều tương tự như thioredoxin ở người (hTRX), hTRXL-N có một đặc điểm độc đáo là sự hiện diện của nhiều gốc tích điện dương xung quanh vị trí hoạt động, cho thấy vai trò tiềm năng trong việc xác định đặc tính của chất nền. Hơn nữa, cấu trúc tinh thể của hTRXL-N là dạng đơn phân, trái ngược với dạng song phân của hTRX trong các cấu trúc tinh thể đã biết. Sự khác biệt này, cùng với điện tích dương tại vị trí hoạt động, gợi ý một cơ chế điều hòa mới, có thể liên quan đến tương tác với vùng C-terminal giàu axit amin.

Mục lục chi tiết:

• Crystal structure of the catalytic domain of a human thioredoxin-like protein
• Implications for substrate specificity and a novel regulation mechanism
• Laboratory of Structural Biology and the MOE Laboratory of Protein Science, School of Life Science & Engineering, Tsinghua University, Beijing, China; National Laboratory of Institute of Basic Medical Sciences, Peking Union Medical College and Chinese Academy of Medical Sciences, National Center of Human Genome Research, Beijing, China
• Thioredoxin is a ubiquitous dithiol oxidoreductase…
• Keywords: dithiol oxidoreductase; hTRXL; crystal structure; monomeric; N-terminal.
• Thioredoxin, a group of redox active proteins…
• Correspondence to Z. Rao…
• Abbreviations: hTRXL, human thioredoxin-like protein…
• Enzymes: thioredoxin (EC 1.8.4.8)…
• Note: a website is available at http://www.xtal.tsinghua.edu.cn
• Expression pattern of the hTRXL transcript. Differential expression of hTRXL in human fetal cerebrum of 33- and 13-weeks-old. Human adult tissue Poly(A+) RNA Northern blot (ClonTech)…
• MATERIALS AND METHODS
• DDRT-PCR and full-length cDNA isolation
• Northern blot analysis
• Cloning procedures, expression and purification
• Insulin disulfide reduction assay
• Crystallization and data collection
• Structure determination
• RESULTS AND DISCUSSION
• hTRXL is a gene differentially expressed at different development stages
• Both full-length hTRXL and its N-terminal domain have the thioredoxin-like reductase activity
• Overall structure
• Active site
• Substrate specificity
• The monomeric structure of hTRXL-N
• ACKNOWLEDGEMENTS
• REFERENCES