Báo cáo Y học: Shb links SLP-76 and Vav with the CD3 complex in Jurkat T cells

Shb Links SLP-76 and Vav with the CD3 Complex in Jurkat T Cells

Tên đề tài: Shb Links SLP-76 and Vav with the CD3 Complex in Jurkat T Cells

Tác giả: Cecilia K. Lindholm, Maria L. Henriksson, Bengt Hallberg, and Michael Welsh

Lĩnh vực: Tế bào học phân tử, Y Sinh học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá sự tương tác giữa protein thích ứng Shb và các thành phần liên quan đến tín hiệu tế bào T, bao gồm SLP-76, Gads, Vav và ZAP70. Kết quả chỉ ra rằng SLP-76 và ZAP70 đồng miễn dịch kết tủa với Shb trong tế bào T Jurkat, đồng thời Shb và Vav đồng miễn dịch kết tủa khi được biểu hiện đồng thời trong tế bào COS. Nghiên cứu cũng chứng minh rằng SLP-76, Gads và Vav liên kết độc lập với nhau tại các vùng khác nhau của Shb. Sự biểu hiện quá mức của Shb bị thiếu hụt miền SH2 làm giảm quá trình phosphoryl hóa SLP-76 và Vav, dẫn đến giảm hoạt hóa kinase c-Jun sau kích thích thụ thể tế bào T (TCR). Shb cũng được tìm thấy định vị tại các vi đới màng giàu glycolipid (GEMs) sau khi kích thích TCR. Các phát hiện này cho thấy rằng sau khi kích thích TCR, Shb được nhắm mục tiêu đến các vi đới màng này, nơi Shb hỗ trợ việc tuyển dụng phức hợp SLP-76-Gads-Vav đến chuỗi ζ của thụ thể tế bào T và ZAP70.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Materials and Methods
• Antibodies
• DNA constructs
• Transient transfections
• Binding experiments and immunoprecipitations
• Results
• Expression of Shb with an R522K mutation in the SH2 domain affects the co-immunoprecipitation of several tyrosine phosphorylated proteins
• Shb associates with SLP-76, ZAP70 and Vav in CD3 stimulated Jurkat T cells
• Peptide synthesis and peptide inhibition experiments
• Isolation of GEM fractions
• Effects of expression of R522K Shb in Jurkat T cells on JNK and Rac1 activation
• Shb is recruited to GEMs after TCR ligation
• Discussion
• Acknowledgements
• References