Báo cáo Y học: The proximal cis-acting elements Sp1, Sp3 and E2F regulate mouse mer gene transcription in Sertoli cells

The Proximal cis-Acting Elements Sp1, Sp3 and E2F Regulate Mouse Mer Gene Transcription in Sertoli Cells

Tác giả: Connie C. S. Wong and Will M. Lee

Lĩnh vực: Department of Zoology, The University of Hong Kong, China

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc khám phá các yếu tố điều hòa phiên mã của gen Mer trong các tế bào Sertoli của chuột. Các nhà khoa học đã xác định được một đoạn promoter ngắn của gen Mer, thiếu TATA box và CAAT box. Thông qua các thí nghiệm như Southern blot, 5′ RACE và phân tích hoạt tính promoter bằng luciferase, họ đã xác định được vị trí khởi đầu phiên mã chính và các yếu tố phiên mã quan trọng. Nghiên cứu chỉ ra rằng các yếu tố phiên mã Sp1, Sp3 và E2F, cùng với một yếu tố chưa xác định, đóng vai trò thiết yếu trong việc điều hòa hoạt động của promoter Mer.

Mục lục chi tiết:

• The proximal cis-acting elements Sp1, Sp3 and E2F regulate mouse Mer gene transcription in Sertoli cells
• Materials and Methods
• RNA extraction
• Northern blot analysis
• 5′ RACE
• Identification of the Mer 5′-flanking sequence
• In vitro deoxyribonuclease I (DNase I) footprinting
• Site-directed mutation analysis
• Cell culture and transfections
• Results
• Northern blot analysis reveals the difference in the expression pattern between Mer and the other Tyro 3 family members (Axl and Rse) in mouse testes during maturation
• Potential regulatory elements in the mouse Mer 5′-flanking region
• Sequence analysis of mouse Mer 5′-flanking region
• Transcriptional activity of the Mer 5′-flanking region
• TM4 Sertoli cell nuclear protein interactions with the Mer 5′-flanking region
• Sertoli cells nuclear proteins Sp1 and Sp3 bind Sp1 DNA binding motif of the Mer promoter
• Identification of cis-acting elements
• Effect of Sp1, Sp3 and E2F on Mer promoter activity in Sertoli cells
• Discussion