Báo cáo khoa học: Suppression of urokinase receptor expression by bikunin is associated with inhibition of upstream targets of extracellular signal-regulated kinase-dependent cascade

Suppression Of Urokinase Receptor Expression By Bikunin

Tác giả: Hiroshi Kobayashi, Mika Suzuki, Naohiro Kanayama, Takashi Nishida, Masaharu Takigawa, Toshihiko Terao

Lĩnh vực: Biochemistry and Molecular Dentistry, Obstetrics and Gynecology

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khảo sát vai trò của bikunin trong việc điều hòa biểu hiện của thụ thể urokinase-type plasminogen activator (uPAR). Các thí nghiệm đã chứng minh rằng bikunin có khả năng ức chế biểu hiện của uPAR, cả trong điều kiện tự nhiên lẫn khi được kích thích bởi phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA). Cơ chế hoạt động của bikunin dường như liên quan đến việc ức chế các yếu tố thượng nguồn trong con đường tín hiệu phụ thuộc vào ERK (extracellular signal-regulated kinase), độc lập với việc bikunin được đưa vào từ bên ngoài hay được biểu hiện nội sinh.

Mục lục chi tiết: (Trích xuất tự động từ file gốc)

• Introduction
• Materials and Methods
• Cell culture
• Plasmid construction and transfection into the HRA cell line
• Northern blot analysis
• Western blot
• uPAR protein assay: measurement of ligand binding
• Invasion assay
• Statistical analysis
• Results
• Induction of uPAR mRNA by PMA in HRA cells
• Suppression by bikunin of uPAR mRNA accumulation by PMA
• Suppression by bikunin of unstimulated and PMA-induced uPAR protein expression
• The effects of bikunin and its derivatives on uPAR protein expression
• Suppression by bikunin of ERK1/2 activity in the unstimulated and PMA-stimulated HRA cells
• Domain specificity of bikunin on ERK activation
• ERK activation is associated with uPAR expression
• CDNA transfection of bikunin
• Down-regulation of uPAR mRNA level in bikunin-transfected cells
• Expression of uPAR in HRA cells is associated with an active ERK1/2
• The effect of bikunin and HI-8 as well as neutralizing antibodies against uPA and uPAR on HRA cell invasiveness
• Discussion
• Acknowledgements
• References