Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 7 trang
Dung lượng: 157 KB

Giới thiệu nội dung

Restoring Enzyme Activity in Nonfunctional Low Erucic Acid Brassica Napus Fatty Acid Elongase 1 by a Single Amino Acid Substitution

Tác giả: Vesna Katavic, Elzbieta Mietkiewska, Dennis L. Barton, E. Michael Giblin, Darwin W. Reed, and David C. Taylor

Lĩnh vực: Sinh học phân tử, Di truyền học, Hóa sinh thực vật

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc khôi phục hoạt tính của enzyme elongase axit béo loại 1 (FAE1) không chức năng trong giống Brassica napus có hàm lượng axit erucic thấp (LEA) thông qua một đột biến thay thế một axit amin duy nhất. Các nhà nghiên cứu đã so sánh trình tự protein FAE1 từ các giống Brassica napus có hàm lượng axit erucic cao (HEA) và thấp (LEA). Họ phát hiện ra rằng sự khác biệt quan trọng nằm ở vị trí 282, nơi một gốc phenylalanin trong enzyme LEA FAE1 thay thế gốc serin trong enzyme HEA FAE1. Bằng phương pháp đột biến định hướng theo vị trí, gốc phenylalanin này đã được thay thế bằng serin trong protein LEA FAE1. Kết quả biểu hiện trong nấm men cho thấy hoạt tính của enzyme đã được phục hồi, dẫn đến sự tổng hợp các axit béo chuỗi rất dài (VLCMFAs). Nghiên cứu này lần đầu tiên chỉ ra rằng đặc điểm axit erucic thấp trong B. napus (canola) có thể là do một đột biến axit amin đơn lẻ ngăn cản quá trình sinh tổng hợp axit eicosenoic và erucic.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
    • Vật liệu thực vật
    • Phân lập vùng mã hóa FAE1 và biểu hiện dị thể trong nấm men
    • Phân tích axit béo và định lượng enzyme
    • Đột biến định hướng theo vị trí của gen LEA B. napus cv. Westar FAE1
    • Chuẩn bị màng microsome
    • Phân tích Western blot
  • Kết quả
    • Căn chỉnh trình tự protein Brassica FAE1
    • Biểu hiện gen FAE1 trong nấm men và phân tích GC của FAMEs
    • Đột biến định hướng theo vị trí của gen LEA B. napus cv. Westar FAE1
    • Phân tích Western blot của microsome nấm men
    • Hoạt tính elongase trong phần microsome của tế bào nấm men
  • Bàn luận
  • Lời cảm ơn
  • Tài liệu tham khảo