Xem trước tài liệu

Đang tải tài liệu...

Thông tin chi tiết tài liệu

Định dạng: PDF
Số trang: 7 trang
Dung lượng: 167 KB

Giới thiệu nội dung

Heterologous Expression And Folding Analysis Of A β-Tubulin Isotype From The Antarctic Ciliate Euplotes Focardii

Tác giả: Sandra Pucciarelli, Cristina Miceli, and Ronald Melki

Lĩnh vực: Sinh học Phân tử, Tế bào và Động vật.

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này tập trung vào việc biểu hiện dị loại và phân tích sự gấp nếp của một dạng isotype β-tubulin (β-T1) từ loài trùng lông mọc răng Euplotes focardii, một sinh vật sống ở vùng biển Nam Cực. Các nhà khoa học đã biểu hiện isotype β-tubulin này trong vi khuẩn E. coli và phân tích quá trình gấp nếp của nó. Kết quả cho thấy rằng sự gấp nếp của β-tubulin từ sinh vật hạ đẳng nguyên sinh động vật cần sự hỗ trợ của phức hợp chaperonin tế bào chất CCT và yêu cầu cofactor A để ổn định cấu trúc dạng gấp nếp. Bên cạnh đó, nghiên cứu cũng chỉ ra rằng β-T1 cạnh tranh với isotype β5 tubulin của con người để liên kết với CCT, và so sánh ái lực liên kết của chúng. Ngoài ra, chaperonin ty thể mt-cpn60 cũng liên kết với β-T1 nhưng không thể giải phóng nó ở trạng thái gấp nếp tự nhiên hoặc gần tự nhiên.

Mục lục chi tiết:

  • Giới thiệu
  • Vật liệu và phương pháp
  • Tế bào
  • Chuẩn bị dịch chiết tế bào chất E. focardii, SDS/PAGE và miễn dịch blotting
  • Phân lập E. focardii β-T1 vào vector biểu hiện pET 11a
  • Tinh sạch CCT, mt-cpn60 và Cof A
  • Các xét nghiệm gấp nếp trong ống nghiệm và các thí nghiệm cạnh tranh
  • Kết quả và Thảo luận
  • CCT có trong tế bào chất của E. focardii
  • Đặc tính của E. focardii β-T1 tái tổ hợp
  • Gấp nếp E. focardii β-T1 đòi hỏi CCT và Cof A
  • E. focardii β-T1 không gấp nếp khi có mt-cpn60
  • β-T1 và β5 tubulin người cạnh tranh cùng một vị trí trên CCT
  • Tài liệu tham khảo
  • Lời cảm ơn