Báo cáo khoa học: Oxygen control of nif gene expression in Klebsiella pneumoniae depends on NifL reduction at the cytoplasmic membrane by electrons derived from the reduced quinone pool

Oxygen Control Of Nif Gene Expression In Klebsiella Pneumoniae Depends On Nifl Reduction At The Cytoplasmic Membrane By Electrons Derived From The Reduced Quinone Pool

Tác giả: Roman Grabbe và Ruth A. Schmitz

Lĩnh vực: Vi sinh vật học, Sinh hóa học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá cơ chế điều hòa biểu hiện gen nif (liên quan đến cố định đạm) ở vi khuẩn Klebsiella pneumoniae, đặc biệt tập trung vào vai trò của protein NifL trong việc kiểm soát hoạt động của NifA dưới các điều kiện oxy hóa và giới hạn nitơ. Các kết quả cho thấy NifL bị khử bởi các electron từ pool quinone khử tại màng tế bào chất, một quá trình cần thiết để NifL không ức chế NifA, từ đó cho phép biểu hiện gen nif. Nghiên cứu cũng làm sáng tỏ sự khác biệt trong trao đổi chất kỵ khí giữa K. pneumoniae và E. coli, cũng như vai trò của các enzyme oxy hóa khử khác nhau trong quá trình này.

Mục lục chi tiết:

• Giới thiệu
• Vật liệu và phương pháp
• Các chủng E. coli
• Các chủng K. pneumoniae
• Điều kiện nuôi cấy
• Phân tích β-Galactosidase
• Tinh sạch MBP-NifL
• Phân tích quang phổ của MBP-NifL tinh sạch
• Chuẩn bị các vesicle trong-ra ngoài của K. pneumoniae
• Xác định hoạt tính NADH:ubiquinone oxidoreductase
• Phân tích Southern blot
• Phân tích Western blot
• Chuẩn bị màng
• Kết quả
• Sự khử NifL bởi NADH với sự hiện diện của chất truyền điện trung gian hoặc các vesicle trong-ra ngoài kỵ khí
• Ảnh hưởng của các đột biến ndh và frd nhiễm sắc thể lên sự cảm ứng nif trong hệ thống E. coli dị loài
• NADH:ubiquinone oxidoreductase và formate dehydrogenase-N ảnh hưởng đến sự điều hòa nif ở K. pneumoniae
• Ảnh hưởng của các chất nhận điện tử cuối cùng lên sự điều hòa nif ở K. pneumoniae
• Các dẫn xuất quinone hòa tan đã khử có khả năng khử cofactor flavin của MBP-NifL
• Thảo luận
• Mô hình giả định về sự kiểm soát oxy và nitơ đối với sự điều hòa nif ở K. pneumoniae
• Sự trao đổi chất kỵ khí của K. pneumoniae cố định đạm và E. coli khác nhau ở một số khía cạnh
• Tài liệu tham khảo
• Lời cảm ơn