Báo cáo khoa học: Purification and characterization of novel salt-active acharan sulfate lyase from Bacteroides stercoris HJ-15

Purification and Characterization of Novel Salt-Active Acharan Sulfate Lyase from Bacteroides stercoris HJ-15

Tác giả: Sung-Woon Hong, Ho-Young Shin, Yeong Shik Kim, Dong-Hyun Kim

Lĩnh vực: Sinh hóa, Enzyme học

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này báo cáo về quá trình tinh sạch và đặc trưng hóa một enzyme novel có hoạt tính với muối, được gọi là acharan sulfate lyase, từ vi khuẩn Bacteroides stercoris HJ-15. Enzyme này được phân lập từ vi khuẩn đường ruột người có khả năng phân hủy GAG. Quá trình tinh sạch đạt độ đồng nhất bằng các phương pháp sắc ký kết hợp, với hoạt tính đặc hiệu cuối cùng là 81.33 µmol·min⁻¹·mg⁻¹. Enzyme acharan sulfate lyase này được kích hoạt mạnh bởi các muối như KCl và NaCl, với mức độ tăng hoạt tính gấp 5.3 lần. Trọng lượng phân tử của enzyme là 94 kDa. Hoạt tính tối ưu của enzyme đạt được ở pH 7.2 và nhiệt độ 40 °C. Enzyme bị ức chế mạnh bởi các ion kim loại nặng như Cu²⁺, Ni²⁺, Zn²⁺ và các tác nhân hóa học như PCMS. Các kết quả cho thấy enzyme này có đặc tính sinh hóa khác biệt so với các heparin lyase đã được tinh sạch trước đó, và có thể thuộc nhóm heparin lyase II.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Materials and methods
• Results
• Purification of salt-active acharan sulfate lyase
• Enzyme activity assay
• Characterization of salt-active acharan sulfate lyase
• Substrate specificity of purified salt-active acharan sulfate lyase
• Kinetic constants of purified salt-active acharan sulfate lyase
• Discussion
• Acknowledgements
• References