Báo cáo khoa học: Analysis of the effect of potato carboxypeptidase inhibitor pro-sequence on the folding of the mature protein

Analysis Of The Effect Of Potato Carboxypeptidase Inhibitor Pro-sequence On The Folding Of The Mature Protein

Tên đề tài: Analysis of the effect of potato carboxypeptidase inhibitor pro-sequence on the folding of the mature protein

Tác giả: Sílvia Bronsoms, Josep Villanueva, Francesc Canals, Enrique Querol and Francesc X. Aviles

Lĩnh vực: Institut de Biotecnologia i Biomedicina and Departament de Bioquímica i Biologia Molecular, Universitat Autònoma de Barcelona, Spain

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này điều tra vai trò của các đoạn tiền thân (pro-regions) trong quá trình gấp nếp của protein ức chế carboxypeptidase từ khoai tây (PCI). Các thí nghiệm in vitro và in vivo đã được thực hiện để so sánh quá trình gấp nếp của protein trưởng thành với các dạng tiền thân khác nhau, bao gồm cả dạng có hoặc không có các đoạn tiền thân N-terminal và C-terminal. Kết quả chỉ ra rằng các đoạn tiền thân này không ảnh hưởng đáng kể đến động học gấp nếp hoặc hiệu quả gấp nếp của PCI trưởng thành, cả trong điều kiện in vitro lẫn trong môi trường vi khuẩn E. coli. Tuy nhiên, phân tích cấu trúc cho thấy đoạn tiền thân N-terminal có khả năng tự gấp nếp trong dạng tiền chất.

Mục lục chi tiết:

• Introduction
• Experimental procedures
• Plasmid constructs and mutagenesis
• Protein expression and purification
• In vitro folding experiments
• Exoproteolysis
• Nuclear magnetic resonance
• Results
• Expression in E. coli
• Refolding in vitro
• Influence of pro-sequences in vivo
• Inhibitory activity
• Structural analyses
• Discussion
• Acknowledgments
• References