Báo cáo khoa học: Disorder–order transition of k CII promoted by low concentrations of guanidine hydrochloride suggests a stable core and a flexible C-terminus

Tác giả: Ajit B. Datta, Siddhartha Roy, and Pradeep Parrack

Lĩnh vực: Biochemistry, Biophysics

Nội dung tài liệu: Nghiên cứu này khám phá sự chuyển đổi cấu trúc của protein CII của phage λ dưới tác động của nồng độ thấp guanidine hydrochloride (GdnHCl). Kết quả cho thấy GdnHCl ở nồng độ thấp (50-500 mM) không gây biến tính mà ngược lại, làm tăng cường cấu trúc của protein CII, biểu hiện qua sự gia tăng độ elip quang học, tăng cường cường độ huỳnh quang tryptophan và giảm liên kết ANS. Đồng thời, protein thể hiện sự đề kháng với quá trình phân giải bởi trypsin và sự kết tụ nhiệt. Các thí nghiệm cũng khẳng định CII duy trì trạng thái tetramer ngay cả ở nồng độ GdnHCl thấp. Dựa trên các quan sát này, một mô hình cấu trúc cho CII đã được đề xuất, trong đó protein tồn tại ở trạng thái cân bằng giữa một dạng compact và một dạng dễ bị phân giải bởi enzyme, với vùng C-terminal có cấu trúc linh hoạt.

Mục lục chi tiết:

• Materials and methods
• CD spectroscopy
• Fluorescence spectroscopy
• ANS fluorescence
• Effect of other salts
• Temperature-induced aggregation
• Oligomeric status of the Cll protein
• One-dimensional NMR experiments
• Partial proteolysis
• Discussion
• Conclusion
• Acknowledgements
• References